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伏隔核壳部小清蛋白阳性GABA能神经元对颞叶癫痫发作的调控及作

用机制研究

摘要

研究目的：伏隔核(Nucleusaccumbens,NAc)是腹侧纹状体的重要组成部分，

同时也是连接大脑额颞叶的重要结构。已有多项研究表明伏隔核，尤其是其壳部

(NAcshell)，与颞叶癫痫(Temporallobeepilepsy,TLE)的发生密切相关，然而有关

该核团介导的具体神经环路机制却并不明确。大脑的异常放电所致的癫痫发作被认

为是谷氨酸能(Glutamate,Glu)兴奋性神经元和抑制性γ-氨基丁酸能(γ-

aminobutyricacid,GABA)神经元失衡的结果。其中小清白蛋白(Parvalbumin,PV)

阳性神经元作为GABA能神经元的重要亚型，在神经功能网络中发挥着重要作用。

因此，本次的研究聚焦于伏隔核壳部小清白蛋白阳性GABA能神经元，揭示其在颞

叶癫痫发生中的作用和机制。

研究方法：通过海马内注射红藻氨酸(kainicacid，KA)来建立癫痫化学点燃模

型。利用化学遗传学来特异性调控神经元活性，结合示踪病毒标记上下游输入输出

脑区，研究PV神经元在颞叶癫痫中所发挥的作用及机制。

研究结果：首先通过化学遗传学病毒技术激活/抑制NAcshell中PV神经元。发

现PV神经元的激活可以抑制癫痫小鼠急性期和慢性期的发作，表现为:2小时的急

性期中首次全面性发作(Generalizedseizure,GS)的潜伏期增长、局灶性发作(Focal

seizure,FS)的总发作次数和时长减少、GS的总发作次数和时长减少；2个月后的慢

性期中GS和FS的总发作次数和时长均得到控制。而抑制PV神经元会加重小鼠的

急性期和慢性期的发作，具体表现为：急性期中首次GS的潜伏期缩短、FS的总发

作次数和时长增加、GS的总发作时长增加；慢性期中FS的总发作次数和时长增加。

为了探究PV神经元在脑中的下游投射脑区，我们通过Ruby病毒来实现对目标神经

元的顺向示踪，发现在背侧和腹侧海马区均可见神经元突触联系，提示NAcshell区

PV神经元可直接支配下游海马。因此，我们在化学遗传学病毒表达期结束后，仅局

部激活下游的海马投射纤维，从而实现对NAc-HipPV环路的特异性调控。结果发现

激活海马区的投射纤维同样可以减轻TLE小鼠急性期和慢性期的发作，表现为：急

性期FS和GS的总发作次数和时长减少；慢性期可见FS的总发作次数和时长减

少。而抑制海马区的投射纤维后，TLE小鼠急性期和慢性期中FS和GS的发作次数

和时长均不受影响。最后，通过RV病毒来逆向追踪NAc壳部PV神经元的上游输

入，结果发现PV神经元可接受来自多个上游脑区的支配，包括:下丘脑(lateral

hypothalamus,LH)、丘脑底核(subthalamicnucleus,STh)、束旁核(parafascicular

I

nucleus,PF)、基底外侧杏仁核后部(basolateralamygdalaposteriorpart,BLP)、杏仁

核海马区外侧部(amygdalohippocampalarealateralpart,AHiAL)、海马(hippocampus,

Hip)等。

结论：NAcshellPV能神经元对颞叶癫痫的发作具有双向调控作用。本研究还

发现NAcshellPV神经元为长程投射神经元，在包括海马在内的多个脑区都有密集

的神经支配，可通过激活下游海马区来发挥抗癫痫作用。结合病毒上下游追踪结果，

发现该神经元与外侧缰核、下丘脑、基底外侧杏仁核等脑区之间存在丰富的双向投

射联系。为后续癫痫病理生理学机制的研究和临床耐药性患者的辅助替代治疗提供

了新的方向。

硕士研究生：蒋彤