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斑马鱼模式动物行业研究报告

斑马鱼是一种小型、易于繁殖且胚胎发育透明的实验动物，与人类基因组重复率高达87%。近年来，斑马鱼技术除在发育生物学、疾病机制研究等领域得到应用外，在化妆品、功能食品及中药研发领域的应用潜力得到产业界的更广泛关注。

1、斑马鱼行业概述

1.1斑马鱼生物特征和分类

1.1.1斑马鱼生物学特征

斑马鱼（Daniorerio，Zebrafish）又名蓝斑马鱼、印度斑马鱼、蓝条鱼、花条鱼、印度鱼），是一种热带淡水鱼，为辐鳍鱼纲鲤形目鲤科的其中一种。原生于喜马拉雅地区，是一种受欢迎的观赏性鱼类。同时，斑马鱼已经成为一种重要的模式生物，在生命科学等领域有着越来越广泛的应用。

图1.野生斑马鱼形态

表1.斑马鱼生物学特征

1.1.2斑马鱼的生殖发育

斑马鱼的胚胎发育迅速，受精后72小时内主要的组织器官基本形成：受精后0h开始在动物极顶端形成合子，受精卵的动物极和植物极分开（见右侧，如0h时图）；随后，卵裂形成两个细胞（见0.75h时图）；卵裂以每15分钟一次速度持续进行，直至形成上千个小细胞，进入高囊胚期（见3.25h时图）；随着细胞分裂的继续进行，胚胎进入了原肠期，在受精后8h达到了75%外包期（见8h时图），受精后16h斑马鱼的头和尾开始形成（见16h时图），24h时尾巴完全从卵黄囊中分离出来（见24h时图）；72h时左右斑马鱼从卵膜中孵化，卵黄囊逐渐收缩（见72h时图）。大约3个月后，成年斑马鱼进入生殖成熟期（见右图底端图）。

图2.斑马鱼发育阶段

1.1.3斑马鱼的品种分类

1野生品系

目前斑马鱼野生品系有20余个。研究中常用的斑马鱼野生型品系主要为AB品系、Tuebingen(Tu)品系、WIK品系，斑马鱼基因组计划所用品系是Tu。AB品系是实验室常用的斑马鱼品系，由单倍体细胞经早期加压法获得。Tu品系斑马鱼具有胚胎致死突变基因，用于基因组测序前敲除该致死突变基因。WIK品系较Tu品系具有更多的形态多样性。以下为常见斑马鱼野生品系类型介绍：

AB品系：是最早被采集和研究的斑马鱼野生品系，也是最常用的品系之一。它们具有经典的蓝色底色和黑色纵向条纹。

图3.斑马鱼AB品系

Tu品系：也是一种常见的野生品系，是来自孟加拉国的斑马鱼。相较于AB品系，Tu品系的体型稍大，通常体长在3-4厘米之间。与其他斑马鱼品系相比，Tu品系斑马鱼具有较高的免疫力和抗病性，这使得它们在进行疾病模型研究时更为可靠和稳定。

图4.斑马鱼Tu品系

WIK品系：是一种具有白色底色和黑色纵向条纹的斑马鱼品系，它们在实验室中被广泛用于研究颜色和纹理发育。除了以上提到的品系，还有许多其他野生品系，如Ekkwill(EK)、Nacre(NA)、Riken(RIK)等，每个品系都有其特定的特征和适用于研究的优势。研究人员可以根据自己的需要选择适合的野生品系进行实验和研究。斑马鱼信息网（ZFIN，/）提供了最新的目前已知野生型斑马鱼信息。

2、基因编辑品系

斑马鱼是研究发育生物学的新兴模式动物。斑马鱼由于具有饲育容易、胚胎透明、体外受精、突变种多、遗传学工具成熟等诸多优点，近年来已成为研究脊椎动物发育与人类遗传疾病的新兴模式生物。与其他脊椎动物相较下，斑马鱼最大的优点就是具有多达6000多种的遗传突变种，这些突变种的建立大致上是利用X射线、ENU或逆转录病毒的感染造成基因组的突变，之后再经由多次的子代筛选所得。这些突变种的表征包含如胚层分化，器官发育，生理调适与行为表现等多方面，所以可提供研究人员极佳的正向遗传学材料来进行发育机制上的研究。另外在斑马鱼系统中也开发出阻断基因功能的工具-吗啉基，可快速以逆向遗传学手法来验证基因的功能。所以正向遗传学与逆向遗传学的巧妙利用，可以正确推导出斑马鱼遗传发育途径，也是目前斑马鱼成为研究人类疾病新兴模式生物的主要原因。

从2003年后期起，表达绿色、红色、黄色荧光蛋白的转基因品种斑马鱼在美国上市。表达荧光蛋白的斑马鱼也被商家称为“萤光鱼”。其中leopard品种，之前被称为Daniofrankei，是一种由于色素变异产生的带点状色彩的斑马鱼品种。

图5.leopard品种，带蓝点（人工培育种）

随着新技术的发展，斑马鱼基因编辑品系的开发速度越来越快。国际斑马鱼信息网站上（ZFIN）已登记有3000多个斑马鱼突变品系和数千种转基因品系以及基因编辑品系。这些品系资源对于利用斑马鱼开展各种科学研究起着很大的推动作用。

1.2斑马鱼模式动物发展历史

斑马鱼最早被引入科学研究是在20世纪50年代，最初是因为它们在印度和孟加拉河流域广泛分布，并且相对易于获得。早期的研究主要集中在斑马鱼的基因和生物学特征上。研究者对斑马鱼的生长、发育和解剖学特征进行了详细的描述。1970年代初，斑马鱼开始逐渐成为生物学研究的焦点之一。当时