12基因工程的基本操作程序z4班l.pptx

1.2基因工程的基本操作程序

;一、目的基因的获取;(一)从基因文库中获取目的基因;cDNA文库;含有一种生物的全部基因;基因组DNA文库;;;真核细胞基因结构;;(一)从基因文库中获取目的基因;1．有关目的基因的获取和基因文库的理解，不正确的是 ()

A．目的基因可以从自然界中分离，也可以人工合成

B．目的基因主要指编码蛋白质的结构基因

C．基因文库就是基因组文库

D．cDNA文库只含有某种生物的一部分基因;(二）利用PCR技术扩增目的基因;复习：;变性：加热至90～95℃双链DNA解链成为单链DNA

退火：冷却至55～60℃部分引物与模板的单链DNA的特定互补部位相配对和结合

延伸：加热至70～75℃以目的基因为模板，合成互补的新DNA链;;(三)通过DNA合成仪用化学的方法直接人工合成;1、在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是

A、化学合成法??B、基因组文库法

C、cDNA文库法??D、多聚酶链式反应;3.下表关于基因工程中有关基因操作的名词及对应

的内容，正确的组合是 ;5、目的基因主要是指_______________的结构基因。获得目的基因的常见方法有三种：（1）从基因文库中获取目的基因，根据基因的_________序列，基因在________上的位置，基因的________产物mRNA，基因的_______产物蛋白质等获取目的基因。（2）利用PCR技术扩增目的基因，该技术是一项在________完成的核酸合成技术，前提条件是有一段已知目的基因的________序列，以便于合成_________。（3）如果基因较小且核苷酸序列已知，可以通过____________方法。;二、基因表达载体的构建（核心）;基因表达载体的组成：;2、下列关于基因表达载体的叙述不正确的是

A．基因表达载体的构建视受体细胞及导入方式不同而有所差别

B．启动子和终止子都是特殊结构的DNA短片段，对mRNA的转录起调控作用

C．标记基因是为了鉴别受体细胞中是否有目的基因从而便于筛选

D．启动子是与RNA聚合酶识别和结合的部位，是起始密码;三、将目的基因导入受体细胞;1、基因工程中科学家常用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞，原因是

A．结构简单、操作方便B．繁殖速度快

C．遗传物质含量少、???单D．性状稳定、变异少

2、基因工程常用的受体细胞有

①大肠杆菌②枯草杆菌

③支原体④动植物细胞

A．①②③④B．①②③

C．②③④D．①②④;3.采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的做法正确的是

①将毒素蛋白质注射到棉受精卵中②将编码毒素蛋白的DNA序列注射到棉受精卵中③将编码毒素蛋白的DNA序列与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵中④将编码毒素蛋白的DNA序列与质粒重组，导入细菌感染棉的体细胞，再进行组织培养

A．①②B．②③C．③④D．①④;四、目的基因的检测与鉴定;知识延伸——DNA分子杂交技术;;1.比较载体与基因表达载体的区别。

2.切割DNA获取目的基因和切割载体时一般情况下为什么

要选用同一种限制性核酸内切酶？经过重组过程后会形

成几种DNA分子？

3.分析为什么动物的受体细胞不能为体细胞？

4.讨论大肠杆菌细胞转化时为什么要用Ca2+处理细胞。

5.目的基因进入受体细胞内并在受体细胞内稳定保存的实

质是什么？

6.基因探针的实质是什么？

7.若使农杆菌也能感染单子叶植物，应如何操作？

8.基因工程操作的四个步骤中，有哪几个步骤涉及到碱基

互补配对？;小结:基因工程的基本操作程序;1.细菌的质粒分子带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因在基因工程中的主要作用是

A．提高受体细胞在自然环境中的耐药性

B．有利于对目的基因是否导入进行检测

C．增加质粒分子的分子量

D．便于与外源基因连接

2.有关基因工程的叙述正确的是

A．限制酶只在获得目的基因时才用

B．重组质粒的形成是在细胞内完成的

C．质粒都可作为运载体

D．蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料;3.哪项不是基因表达载体的组成部分

A.启动子B.终止密码子

C.标记基因D.目的基因

4.下列哪项不是将目的基因导入植物细胞的方法A．基因枪法B．显微注射法

C.农杆菌转化法D．花粉管通道法;5、有关基因工程的叙述中，错误的是