文献解析 N6-methyladenosine诱导的circ1662通过加速YAP1核定位促进结直肠癌转移.pdf

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文献解析|N6-methyladenosine诱导的circ1662通

过加速YAP1核定位促进结直肠癌转移

引言

结直肠癌（CRC）是世界上最常见的恶性肿瘤之一，其高转移性是导致患者死亡的主要原因。近年来，环状RNA（circRNA）在癌

症进展中的作用逐渐受到关注。然而，circRNA在CRC转移中的调控机制仍不清楚。本研究团队通过高通量测序、RNA原位杂交（ISH）、

免疫组化（IHC）以及多种分子生物学实验方法，揭示了一种新的circRNA——circ1662，在CRC转移中的重要作用及其调控机制。本

研究不仅为CRC转移机制提供了新的见解，也为CRC的预后和治疗提供了新的标志物和潜在靶点。

材料与方法

1.样本收集与测序

研究团队收集了6对CRC组织及其相邻正常组织，进行高通量测序，以识别mRNA和circRNA的表达谱。通过RNA-ISH和IHC，

对组织芯片中的circ1662进行评估。

2.circ1662功能评估

通过敲低或过表达circ1662，评估其在CRC中的功能。利用CRC细胞系HCT116和SW480，设计circ1662的siRNA和过表达

载体，分析干扰或过表达circ1662后细胞迁移和侵袭的变化情况。

3.分子生物学实验

利用MeRIP-qPCR、RIP-qPCR和RNApull-down实验，确定METTL3、circ1662和YAP1之间的关系。通过免疫荧光、Western

blot和qPCR等方法，进一步解析circ1662调控CRC转移的分子机制。

4.动物实验与临床分析

通过尾静脉注射稳定过表达circ1662的CRC细胞，评估circ1662对CRC肺转移的影响。同时，在临床标本中分析METTL3、circ1662、

YAP1和SMAD3的表达相关性。

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结果

1.circ1662在CRC组织中的高表达及其与预后的关系

研究团队首先通过高通量测序，发现circ1662在CRC组织中的表达显著高于相邻正常组织。进一步分析显示，circ1662的高表达

与CRC患者的预后不良和肿瘤深度相关。这一结果提示circ1662可能在CRC的发生和发展中起重要作用。

2.circ1662促进CRC细胞的侵袭和迁移

为了评估circ1662在CRC中的功能，研究团队设计了circ1662的siRNA和过表达载体，并在CRC细胞系HCT116和SW480中

进行了实验。结果显示，敲低circ1662显著抑制了CRC细胞的迁移和侵袭能力，而过表达circ1662则显著促进了CRC细胞的迁移和

侵袭。这一结果证实了circ1662在CRC转移中的重要作用。

3.circ1662通过调控YAP1核定位促进CRC转移

为了解析circ1662促进CRC转移的分子机制，研究团队进行了进一步的研究。通过原位杂交和胞质-核组分分离实验，发现circ1662

既可以定位在细胞质中，也可以定位在细胞核中。利用catRAPID工具分析和anti-YAP1的RIP-qPCR实验，证明circ1662具有结合

YAP1的功能，并能促进YAP1的核定位。进一步的研究表明，过表达circ1662后，YAP1的核定位增加，同时YAP1的S127磷酸化

下降。这一结果说明circ1662通过结合并促进YAP1核定位，从而促进了CRC的转移。

4.circ1662通过YAP1抑制SMAD3的表达

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