微生物课件微生物的生长.pptx

微生物课件微生物的生长

第一节微生物生长得测定

一、微生物生长概述

二、以数量变化对微生物生长情况进行测定

三、以生物量为指标测定微生物得生长

要求：掌握微生物生长得概念及常规测定方法

(原理和操作)

一、微生物生长概述

生长growth:有机体得细胞组分与结构在量方面得增加。

表现为细胞质得量不断增加，体积加大。

繁殖reproduction由于细胞分裂而引起得个体数目得增加。

单细胞微生物如细菌，生长往往伴随着细胞数目得增加。

多细胞微生物(如某些霉菌)细胞数目得增加(菌丝细胞

得不断延长或分裂)如不伴随着个体数目得增加，只能叫生长。只有通过形成无性孢子或有性孢子使得个体数目增加得过程才叫做繁殖。

一般情况下，当环境条件适合时，生长与繁殖始终就是交替进行得。从生长到繁殖就是一个由量变到质变得过程，这个过程就就是发育development。

纯培养技术

·微生物在自然界总就是混杂地生活在一起，要想研究某一种微生物，必须把研究对象从混杂群体中分离出来。

纯培养(pureculture)——微生物学中把从一个细胞或一群相同得细胞经过培养繁殖而得到得后代，称纯培养、

获得纯培养得方法

①稀释倒平板法pourplatemethod

②涂布平板法spreadplatemethod

③平板划线分离法streakplatemethod

④利用选择培养基分离

⑤单细胞(单孢子)分离法

1、稀释倒平板法

操作较麻烦，对

好氧菌、热敏感

菌效果不好!

2、涂布平板法

使用较多得常规

方法，但有时涂

布不均匀!

3、平板划线分离法(StreakPlate)

特点：快速、方便。

分区划线(适用于浓度较大得样品)

连续划线(适用于浓度较小得样品)

4、选择培养分离

为了从混杂得微生物群体中分离出某种微生物，可以根据该微生物得特点，包括营养、生理、生长条件等，采用选择培养得方法进行分离。

抑制大多数其她微生物得生长，使待分离得微生物生长更快，数量上升

直接挑取待分离得微生物得菌落获得纯培养。

*利用选择培养基进行直接分离

*富集培养

利用选择培养基分离

根据所要分离得菌种得特性选用培养基：

①分离真菌用马丁氏培养基，pH偏酸；分离放线菌用高氏1号，pH中性偏碱。

②根据不同菌对化学试剂得敏感性：

分离放线菌，培养基中加10%酚，抑制细菌、真菌；

从土壤中分离真菌，加链霉素，抑制细菌生长。

③根据分离对象得营养特征：

分离能发酵纤维素得菌株，培养基以纤维素为唯一碳源。

分离固氮菌，用无氮培养基。

5、单细胞(单孢子)分离法

采用显微分离法在显微镜下从混杂群体中直接分离单个

细胞或单个个体进行培养以获得纯培养。

毛细管法：用毛细管提取微生物个体，适于较大微生物

显微操作仪：用显微针、钩、环等挑取单个细胞或孢子

小液滴法：将经过适当稀释后得样品制成小液滴，在显微镜下选取只含一个细胞得液滴来进行纯培养物得分离。

大家应该也有点累了，稍作休息

大家有疑问的，可以询问和交

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1、培养平板计数法

2、膜过滤培养法

3、显微镜直接计数法

三、以生物量为指标测定微生物得生长

第一节微生物生长得测定

在微生物学中提到得“生长”,一般均指群体生长。

二、以数量变化对微生物生长情况进行测定

1、比浊法

2、重量法

3、生理指标法

二、以数量变化对微生物生长情况进行测定

1、培养平板计数法

●测定微生物得活菌数viablecount稀释平板测数法diluteplatecount

以CFU(colonyformingunits)表示

·稀释培养测数法(又称最大概率法，MPNmostprobablenumber)(参见实验教材)

2、膜过滤培养法测定含菌较少得空气和水中得微生物数目

将定量得样品通过滤膜过滤，菌体被阻留在滤膜上，取下滤膜进行培养，然后计算菌落数，可求出样品中所含菌数。

菌数低得样品(如水)→膜过滤→培养→菌落计数

水中得细菌总数：124个/100ml

(二)以数量变化对微生物生长情况进行测定

3、显微镜

直接计数法

采用细菌计数板或血球计数板，在显微镜下对微生物数量进行直接计数(计算一定容积里样品中微生物得数量)。

缺点：

■不能区分死菌与活菌；

■不适于对运动细菌得计数；

■需要相对高得细菌浓度；

■个体小得细菌在显微镜下难以观察。

三、以生物量为指标测定微生物得生长

1、比浊法

在一定范围内，菌悬液中得细胞浓度与混浊度成正比，即与光密度成正比，菌数越多，光