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蛋白質的生物合成
表明遺傳資訊傳遞的方向和規律的規則,DNA決定RNA分子的堿基順序又由RNA決定蛋白質分子的氨基酸順序。中心法則(Centraldogma)
mRNA上的核苷酸排列順序與蛋白質中的氨基酸的排列順序的對應關係即遺傳密碼。遺傳密碼是三聯體遺傳密碼
尼倫伯格(.M.W.Nirenberg)(1927~)阿喬(S.Ocha)1905~93柯臘拉(H.G.Khorana)(1922~)遺傳密碼的破譯無細胞翻譯體系均聚核苷酸、兩種或者三種核酸的共聚物作為範本核糖體結合技術1966年破譯全部密碼。
三聯體結合實驗
遺傳密碼表
密碼的無標點性一般情形下遺傳密碼是不重疊的密碼的簡並性。密碼的擺動性(wobble)密碼的相對通用性起始密碼子和終止密碼子遺傳密碼的主要特徵
簡並性遺傳密碼共有64個,其中61個密碼子對應20中氨基酸,除色氨酸和甲硫氨酸僅有一個密碼子外,其餘氨基酸有2個以上三聯體為其編碼。
擺動性(wobble)轉運氨基酸的tRNA的反密碼需要通過堿基互補與mRNA上的遺傳密碼反向配對結合,但反密碼與密碼間不嚴格遵守常見的堿基配對規律,稱為擺動配對。
密碼子、反密碼子配對的擺動現象tRNA反密碼子第1位堿基IUGACmRNA密碼子第3位堿基U,C,AA,GU,CUG
通用性(universal)蛋白質生物合成的整套密碼,從原核生物到人類都通用。已發現少數例外,如動物細胞的線粒體、植物細胞的葉綠體。
遺傳密碼的偏愛性多數氨基酸有一個以上的密碼子但這些密碼子使用的頻率各不相同,稱之遺傳密碼的偏愛性密碼子使用的頻率與細胞內相應的tRNA含量有關.
3ˊ端-CCA上的氨基酸接受位點。識別氨醯-tRNA合成酶的位點核糖體識別位點反密碼子位點tRNA分子上與多肽合成有關的位點至少有四個:
原料的活化(一)氨基酸+ATP-E—→氨基醯-AMP-E+AMP+PPi
氨基醯-AMP-E+tRNA↓氨基醯-tRNA+AMP+E原料的活化(二)
蛋白質合成的場所——核糖體
不同細胞核蛋白體的組成原核生物真核生物核蛋白體小亞基大亞基核蛋白體小亞基大亞基S70S30S50S80S40S60SrRNA16S5S、23S18S28S、5S、5.8蛋白質21種36種33種49種
核糖體與tRNA的結合A位:即氨基醯位(aminoacylsite),氨基醯tRNA加入到A位上。P位:即肽位(peptidylsite),3′端連接肽鏈的肽醯tRNA佔據的位置。E位:排出位(exitsite)
核糖體同時與同一mRNA的不同部位相連,構成多核糖體(polyribosome),形成念珠狀。mRNA鏈上核糖體的密度大約為每80個核苷酸1個核糖體。多聚核糖體(polyribosome)
mRNA與編碼的多肽遺傳學將編碼一個多肽的遺傳單位稱為順反子(cistron)。原核生物的一段mRNA常常編碼幾種功能相關的蛋白質,多順反子mRNA。真核生物的一段mRNA常常只能編碼一條多肽鏈,單順反子mRNA。
肽鏈合成的起始(initiation)
合成的起始信號起始密碼:絕大多數為AUG,少數GUG原核生物的SD序列:起始密碼上游約10個核苷酸處有一段富含嘌呤的序列,可與16SrRNA的3’端互補,與起始有關。真核生物的mRNA為單順反子,有5’帽子結構,大多在第一個AUG開始
真核生物:Met-tRNAiMet原核生物:fMet-tRNAifMetfMet為tRNAi與Met結合後被甲醯化酶以一碳單位甲醯化起始肽鏈合成的氨基醯-tRNA
原核:三種——IF-l、2和3,真核:十種——eIFIF-3使核糖體大小亞基分開,IF1、2促進fMet-tRNAifMet、mRNA、30S的結合。起始因數IF和eIF
原核生物翻譯起始複合物形成核蛋白體大小亞基分離;mRNA在小亞基定位結合;起始氨基醯-tRNA的結合;核蛋白體大亞基結合。
真核生物翻譯起始複合物形成核蛋白體大小亞基分離;起始氨基醯-tRNA結合;mRNA在核蛋白體小亞基就位;核蛋白體大亞基結合。
met40S60SMetMet40S60SmRNAeIF-2B、eIF-3、eIF-6①elF-3②GDP+Pi各種elF釋放elF-5④ATPADP+PielF4E,elF4G,elF4A,elF4B,PAB③MetMet-tRNAiMet-elF-2-GTP真核生物翻譯起始複合物形成過程
肽鏈合成的延伸根據mRNA密碼序列的指導,順序添加的氨基酸從N端向C端延伸肽鏈,直到合成終止。肽鏈延長每增加一個氨基酸,包括三個重複的延伸步驟:進位(entrance)成肽(peptidebondforma
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