黄花菜根多糖的降糖活性及机制研究.pdf

中文摘要

胰岛素抵抗（Insulinresistance，IR）是由于胰岛素作用减弱使葡萄糖利用率降

低、糖原合成受阻以及糖异生速率下降导致血糖稳态失调且与II型糖尿病（Type2

diabetemellitus，T2DM）发病密切相关。近年来关于从天然植物中提取活性成分的

研究广受关注。据报道，植物多糖可以作为抗氧化、抗肿瘤和降血糖等的有效治疗

药物。黄花菜是药食两用的植物，其根是重要的中药材，从中提取的多糖具有降糖

的潜能。本研究以黄花菜根多糖（HcBRPS3）为研究对象，通过建立IR-HcBRPS3

细胞模型和T2DM小鼠模型来探究其降糖活性及机制。主要研究内容和结果如下：

第一部分，研究HcBRPS3改善HepG2细胞的胰岛素抵抗。使用MTT法评估

HcBRPS3和软脂酸（Palmiticacid，PA）对HepG2细胞存活的影响。用PA处理HepG2

细胞构建胰岛素抵抗模型。使用试剂盒检测法分析葡萄糖消耗量、糖原合成量、葡

萄糖生成量、丙酮酸激酶（PyruvateKinase，PK）活力以及其他糖代谢相关的基因的

mRNA表达。实验结果表明：20μg/mL以内的HcBRPS3和0.2mmol/L的PA对HepG2

细胞存活无抑制作用。HcBRPS3的处理可以使IR-HepG2细胞中的葡萄糖消耗量、

糖原合成量和PK活力上升以及GCK的mRNA表达上调，增加葡萄糖的利用，减少

葡萄糖的产生，下调FOXO1、PEPCK和G6Pase在IR-HepG2细胞中的mRNA表达，

抑制糖异生，进而改善IR。

第二部分，研究HcBRPS3改善HepG2细胞胰岛素抵抗的机制。使用检测试剂

盒分析氧化应激相关指标，运用蛋白免疫印迹法（WB）和荧光定量PCR（qPCR）

法等技术评价HcBRPS3对HepG2细胞内与胰岛素介导信号通路和氧化应激相关的

蛋白水平和基因表达的影响。结果表明：HcBRPS3可通过激活Nrf2来增强抗氧化能

力，包括上调Nrf2的表达，提高SOD和GSH的水平，降低MDA含量和ROS水平，

从而改善氧化应激并缓解IR。此外，HcBRPS3可上调IRS1、GLUT4、p-AKT和

p-GSK3β的水平，从而加速葡萄糖利用。HcBRPS3减轻IR的作用机制与Nrf2调节

的IRS1-AKT-GSK3β信号通路有关，使用特异性Nrf2抑制剂（ML385）进一步证实

这一结果。

第三部分，研究HcBRPS3对T2DM小鼠的改善作用。采取高糖高脂饮食和STZ

诱导法建立T2DM小鼠模型，HcBRPS3处理后检测对T2DM小鼠的影响。结果表明

I

HcBRPS3处理可以提高T2DM小鼠的血糖控制效率（空腹血糖、葡萄糖耐受量和血

清胰岛素）、改善血脂水平（TC、TG、HDL-C和LDL-C）、脏器损伤（肝脏、肾脏

和胰腺）、肝肾功能（AST、ALT、BUN和Cr）和氧化应激水平（GSH、MAD和SOD），

增强胰岛素信号通路，表明HcBRPS3有降血糖作用。

综上所述，HcBRPS3在体内外实验中均具有良好的抗糖尿病活性。HcBRPS3处

理可以改善HepG2细胞的IR程度以及T2DM小鼠的高血糖、氧化应激和脏器受损

等症状，进一步研究发现其降血糖的作用机制是通过调节糖代谢、降低氧化应激水

平和调节信号通路相关因子表达水平的方式改善IR-HepG2细胞和T2DM小鼠的胰

岛素抵抗，达到降血糖的目的。

关键词：黄花菜根多糖；Ⅱ型糖尿病；胰岛素抵抗；氧化应激；信号通路

Ⅱ

ABSTRACT

Insulinresistance(IR)isadysregulationofglucosehomeostasisduetoreduced

glucoseutilization,impairedglycogensynthesis,and