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诺如病毒实验室检测方法2025
为避免实验室污染，食品、水、环境样品与病人标本不能在同一实验室检
测，必须分别在独立的空间进行样品处理和检验。
(1)Real-timeRT-PCR
ORF1/0RF2区是诺如病毒基因组中最保守的区域，在同一基因型不同
毒株间有相同的保守序列，根据这段保守区域可用千设计TaqMan为基
础的Real-timeRT-PCR的引物和探针。除可检测病例临床标本中
R
的诺如病毒NA外，引物和探针经优化提高灵敏度后，还可用千环境样
Real-timeRT-PCR
本（如食物和水）的检测。的敏感性高千传统
RT-PCR,可检测诺如病毒GI群和GII群。
(2)传统RT-PCR
采用传统RT-PCR对Real-timeRT-PCR阳性标本的PCR产物
进行测序，通过序列分析确定诺如病毒的基因型。测定ORF2完整衣
壳
蛋白基因序列，是诺如病毒基因分型的金标准。基因组中四种不同的区
域(RegionA-D)均可用千诺如病毒基因分型，基千衣壳蛋白区Region
C和D两区域分型效果更好。但对千GII.4变异株的进一步分型，仅
根据RegionC一RegionD。
序列不足以区别，需进步扩增
抗原检测
由千诺如病毒抗原高度变异（基因型超过29个）且某些基因型存在抗原
漂移（如Gil.4型），开发广泛反应的ELISA方法存在较大挑战。虽
然目前已有商品化的试剂盒如IDEIA(Oxiod，英国）、SRSV(II)-AD
(DenkaSeiken，日）以及RIDASCREE(r-BiopharmAG,德
本
国），但其敏感性(36%和特异性(47%-100%）均不太理
-80%）
想。即使已通过美国FDA认证的RIDASCREEN诺如病毒第三代
ELISA试剂盒，也没有在美国广泛应用。ELISA可适用千暴发疫情中大
矗样本的筛查，但不适合散发病例的检测。ELISA检测结果阴性的样本
还需要通过Real-timeRT-PCR进行第二次验确认。鉴千ELISA
检
试剂盒成本高、敏感性低，ELISA方法仅可作为辅助检测手段。
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