蛋白质合成1课件.ppt

（3）校正tRNA

???校正tRNA分為無義突變及錯義突變校正。

???在蛋白質的結構基因中，一個核苷酸的改變可能使代表某個氨基酸的密碼子變成終止密碼子（UAG、UGA、UAA），使蛋白質合成提前終止，合成無功能的或無意義的多肽，這種突變就稱為無義突變。五．AA-tRNA合成酶AA-tRNA合成酶是一類催化氨基酸與tRNA結合的特異性酶，其反應式如下：它實際上包括兩步反應：第一步是氨基酸活化生成酶-氨基醯腺苷酸複合物。

AA+ATP+酶（E）→E-AA-AMP+PPi

第二步是氨醯基轉移到tRNA3’末端腺苷殘基上，與其2’或3’-羥基結合。

E-AA-AMP+tRNA→AA-tRNA+E+AMP蛋白質合成的真實性主要決定於AA-tRNA合成酶是否能使氨基酸與對應的tRNA相結合。AA-tRNA合成酶既要能識別tRNA，又要能識別氨基酸，它對兩者都具有高度的專一性。不同的tRNA有不同堿基組成和空間結構，容易被tRNA合成酶所識別，困難的是這些酶如何識別結構上非常相似的氨基酸。有兩道關口:

Thefirstfilteristheinitialbindingoftheaminoacidtotheenzymeanditsactivationtoaminoacyl-AMP.?

Thesecondfilteristhebindingofincorrectaminoacyl-AMPproductstoaseparateactivesiteontheenzyme.六.核糖體核糖體像一個能沿mRNA範本移動的工廠，執行著蛋白質合成的功能。它是由幾十種蛋白質和幾種核糖體RNA（ribosomalRNA，rRNA）組成的亞細胞顆粒。一個細菌細胞內約有20000個核糖體，而真核細胞內可達106個，在未成熟的蟾蜍卵細胞內則高達1012。核糖體和它的輔助因數為蛋白質合成提供了必要條件。1.核糖體的組成???原核生物核糖體由約2/3的RNA及1/3的蛋白質組成。真核生物核糖體中RNA占3/5，蛋白質占2/5。核糖體是一個緻密的核糖核蛋白顆粒，可以解離為兩個亞基，每個亞基都含有一個相對分子品質較大的rRNA和許多不同的蛋白質分子。???大腸桿菌核糖體小亞基由21種蛋白質組成，分別用S1……S21表示，大亞基由33種蛋白質組成，分別用L1……L33表示。真核生物細胞核糖體大亞基含有49種蛋白質，小亞基有33種蛋白質。?2、rRNA3.核糖體的功能????核糖體包括至少5個活性中心，即mRNA結合部位、結合或接受AA-tRNA部位（A位）、結合或接受肽基tRNA的部位、肽基轉移部位（P位）及形成肽鍵的部位（轉肽酶中心），此外還有負責肽鏈延伸的各種延伸因數的結合位點。小亞基上擁有mRNA結合位點，負責對序列特異的識別過程，如起始位點的識別和密碼子與反密碼子的相互作用。大亞基負責氨基酸及tRNA攜帶的功能，如肽鍵的形成、AA-tRNA、肽基-tRNA的結合等。A位、P位、轉肽酶中心等主要在大亞基上。核糖體可解離為亞基或結合成70S/80S顆粒。翻譯的起始階段需要游離的亞基，隨後才結合成70S/80S顆粒，繼續翻譯進程。體外反應體系中，核糖體的解離或結合取決於Mg2+離子濃度。在大腸桿菌內，Mg2+濃度在10-3mol/L以下時，70S解離為亞基，濃度達10-2mol/L時則形成穩定的70S顆粒。細胞中大多數核糖體處於非活性的穩定狀態，單獨存在，只有少數與mRNA一起形成多聚核糖體。它從mRNA的5末端向3末端閱讀密碼子，至終止子時合成一條完整的多肽鏈。mRNA上核糖體的多少視mRNA的長短而定，一般40個核苷酸有一個核糖體。七.信使核糖核酸mRNAmessengerribonucleicacidDNAdeoxyribonucleicacid.??雖然mRNA在所有細胞內執行著相同的功能，即通過三聯子密碼翻譯生成蛋白質，其生物合成的具體過程和成熟mRNA的結構在原核和真核生物細胞內是不同的。八、蛋白質的生物合成核糖體是蛋白質合成的場所，mRNA是蛋白質合成的範本，tRNA是範本與氨基酸之間的接合體。此外，有20種以上的AA-tRNA及合成酶、10多種起始因數、延伸因數及終止因數，30多種tRNA及各種rRNA、mRNA和100種以上翻譯後加工酶參與蛋白質合成和加工過程。???蛋白質合成消耗了細胞中90%左右用於生物合成反應的能量。細菌細胞中的2萬個核糖體，10萬個蛋白質因數和20萬個tRNAs約占大腸桿菌幹重的35%。