体外哺乳类细胞HGPRT基因突变试验.pptx

中华人民共和国国家标准

犌B15193．12—2014

食品安全国家标准

体外哺乳类细胞H犌PRT基因突变试验

2014-12-24发布2015-05-01实施

中华人民共和国

发布

国家卫生和计划生育委员会

犌B15193．12—2014

前言

本标准代替GB15193．12—2003《体外哺乳类细胞(V79／HGPRT)基因突变试验》。

本标准与GB15193．12—2003相比，主要变化如下：

—标准名称修改为“食品安全国家标准体外哺乳类细胞HGPRT基因突变试验”；

—增加了术语和定义；

—修改了试验目的和原理；

—增加了不同种类受试物的配制方法；

—增加了参考阳性对照物；

—增加了试验用细胞株。

Ⅰ

犌B15193．12—2014

食品安全国家标准

体外哺乳类细胞H犌PRT基因突变试验

1范围

本标准规定了体外哺乳类细胞次黄嘿岭鸟嘿岭磷酸核糖转移购(HGPRT)基因突变试验的基本试

验方法和技术要求。

本标准适用于评价受试物的致突变作用。

术语和定义

2

2．1H犌PRT基因

哺乳类动物的次黄嘿岭鸟嘿岭磷酸核糖转移购基因。在人类，HGPRT基因定位于X染色体的长

臂，坐标为Xq26．1；在小鼠也定位于X染色体。

2．2突变频率

在某种细胞系中，某一特定基因突变型的细胞(集落)占细胞(集落)总数的百分率。

试验目的和原理

3

细胞在正常培养条件下，能够产生HGPRT，在含有6-硫代鸟嘿岭(6-thioguanine，6-TG)的选择性

培养液中，HGPRT催化产生核昔-5′-单磷酸(NMP)，NMP掺入DNA中致细胞死亡。在致癌和(或)

致突变物作用下，某些细胞X染色体上控制HGPRT的结构基因发生突变，不能再产生HGPRT，从而

使突变细胞对6-TG具有抗性作用，能够在含有6-TG的选择性培养液中存活生长。

在加入和不加入代谢活化系统的条件下，使细胞暴露于受试物一定时间，然后将细胞再传代培养，

在含有6-TG的选择性培养液中，突变细胞可以继续分裂并形成集落。基于