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基因工程的基本操作程序
(30分钟100分)
一、选择题(共4小题,每小题5分,共20分)
1.下列获得目的基因的方法中须要模板链的是 ()
①从基因文库中获得目的基因
②利用PCR技术扩增目的基因
③反转录法
④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成
A.①②③④B.①②③
C.②③④ D.②③
【解析】选D。从基因文库中获得目的基因不须要模板链,①错误;利用PCR技术扩增目的基因须要模板链,②正确;反转录法合成目的基因须要模板链,③正确;通过DNA合成仪利用化学方法人工合成目的基因不须要模板链,④错误。
【补偿训练】
从基因文库中获得目的基因的依据是 ()
A.基因的核苷酸序列
B.基因的功能
C.基因的转录产物mRNA
D.以上都是
【解析】选D。基因的核苷酸序列、基因的功能、基因的转录产物mRNA均可作为从基因文库中获得目的基因的依据。
2.(2024·北京高二检测)科学家将含有人溶菌酶基因的表达载体注射到鸡胚中获得转基因鸡,目的蛋白在输卵管细胞中特异表达,并能在鸡蛋中收集。下列说法错误的是 ()
A.可从cDNA文库获得人溶菌酶基因
B.RNA聚合酶识别鸡输卵管细胞特异表达的启动子
C.可通过农杆菌转化法将人溶菌酶基因导入鸡胚
D.鸡输卵管细胞可将人溶菌酶分泌到细胞外
【解析】选C。获得目的基因可通过PCR扩增、人工合成和从基因文库中获得,A正确;启动子是转录的起点,也是RNA聚合酶识别和结合位点,B正确;将目的基因导入动物细胞用显微注射技术,C错误;溶菌酶基因可在鸡输卵管细胞表达,合成的溶菌酶是一种分泌蛋白,可分泌到细胞外,D正确。
3.为增加玉米抗旱性,探讨者构建含有某微生物抗旱基因E的重组质粒,用农杆菌转化法转入玉米幼胚组织细胞中,获得抗旱的转基因玉米。下列相关叙述不正确的是 ()
A.提取该微生物mRNA反转录为cDNA,通过PCR可获得大量目的基因
B.将重组质粒置于经CaCl2处理的农杆菌悬液中,可以获得转化的农杆菌
C.用农杆菌转化法将E基因转入玉米幼胚组织细胞须要严格进行无菌操作
D.用E蛋白的抗体进行抗原-抗体杂交,可在个体水平检测转基因玉米的抗旱性状
【解析】选D。提取mRNA进行反转录后得到的cDNA可以作为PCR的模板,PCR技术体外扩增获得大量目的基因,A正确;用CaCl2处理农杆菌,使其处于易于汲取四周环境中的DNA分子的感受态,有利于目的基因导入受体细胞,B正确;用农杆菌转化法将E基因转入玉米幼胚组织细胞进行植物组织培育时,须要严格无菌操作,保证无菌环境,C正确;用E蛋白的抗体进行抗原-抗体杂交,检测到玉米细胞中具有E蛋白是在分子水平进行的检测,D错误。
4.(2024·山东等级考)新型冠状病毒的检测方法目前主要有核酸检测法和抗体检测法。下列说法错误的是 ()
A.抗体检测法利用了抗原与抗体特异性结合的原理
B.感染早期,会出现能检测出核酸而检测不出抗体的状况
C.患者康复后,会出现能检测出抗体而检测不出核酸的状况
D.感染该病毒但无症状者,因其体内不能产生抗体不适用抗体检测法检测
【解析】选D。抗体检测是依据抗原、抗体能够发生特异性结合产生阳性反应,从而进行推断,A项正确;免疫系统产生抗体须要肯定的时间,因此在感染早期,可检测到体内的新型冠状病毒核酸,而不能检测到相应抗体,B项正确;患者康复后,机体体内的新冠病毒已被清除,且体内的抗体会存活一段时间,因此康复后会出现能检测出抗体而检测不出核酸的状况,C项正确;感染该病毒后机体会对该病毒产生免疫反应从而产生抗体,因此可在其体内检测到抗体,其无症状可能是由于体内病毒量小,未出现明显症状,D项错误。
二、非选择题(共5小题,共80分)
5.(14分)科学家经过长期探讨发觉了nemuri基因有促进睡眠的功能。nemuri基因编码的NEMURI蛋白由果蝇大脑中的神经元分泌,具有抗菌活性。目前,科学家采纳基因工程技术,生产NEMURI蛋白药物。请回答:
(1)在获得nemuri基因时,若nemuri基因核苷酸数少,核苷酸序列已知,可以通过____________(仪器)用化学方法干脆人工合成。?
(2)若从果蝇的基因文库中获得nemuri基因,构建基因组文库时,须要用到的酶有______________________;构建cDNA文库时,还须要用到的酶是____________。cDNA文库中的基因__________________(填“含有”或“不含有”)启动子。?
(3)若用PCR技术扩增nemuri基因,前提是要有一段________________________
序列,以便于探讨者依据此序列设计引物。与细胞内DNA复制相比,PCR技术所须要的酶是_____
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