组织印片、压片的制备.docxVIP

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组织印片、压片的制备

(一)组织印片:

1.用锋利刀片剖开刚切取的新鲜肿瘤组织或淋巴结等,然后用清洁载玻片轻压于组织剖面处,将组织表面的细胞成分印在玻片上。用稍微加温的载玻片制备印片时,可印得较多细胞。

2.制作淋巴结印片前,应先用滤纸吸去淋巴结切面上的血液、组织液。

(二)压片:

1.选取微小薄片组织平铺于一张载玻片上,再用另一张载玻片叠加其上并予轻压。

2.脑组织质软,易于制作压片;稍硬的组织需切成细碎薄片制作压片。

四、涂片的固定

(一)用于苏木精-伊红染色和巴氏染色的涂片必须湿固定,即涂片后立即进行固定。乳头溢液涂片和液体标本离心沉淀物涂片,应待涂膜潮干(即周膜稍干而其中央区域未干)时进行固定。用于瑞氏染色、May-Grünwald姬姆萨染色和免疫细胞化学染色的涂片,必须干固定,即待涂片稍干后再进行固定。

(二)固定液

1.乙醇-冰醋酸液:95%乙醇∶冰醋酸=99∶1。常用。

2.乙醇-乙醚液:95%乙醇49.5ml,乙醚49.5ml,冰醋酸1ml。较常用。

3.甲醇:滴加在干燥涂片上,用于瑞氏染色、May-Grünwald姬姆萨染色

和免疫细胞化学染色。

4.丙酮:适用于酮类染色。

5.Carnoy液:由无水乙醇、氯仿、冰醋酸按6:3:1比例混成,适用于显

示核酸、糖原、黏液染色。涂片在Carnoy液固定3~5min后,应移入95%乙醇中继续固定。

6.对于液体标本的离心沉淀物、试管拉网获取的小块组织或吸出物中的细小组织块等,固定于4%中性甲醛液中1h,然后制作常规石蜡包埋切片。

(三)固定方法

1.浸入法:

(1)将稍微干燥(不能完全干燥)的涂片直接浸泡于固定液内至少15~

30min.

(2)因细胞容易脱落,宜以一个盛有固定液的容器只固定一例标本的涂片;一个容器固定多例涂片时,有可能造成的肿瘤细胞交叉污染。

(3)必要时可将标本涂在硅化载玻片上,以防脱落。

(4)固定液重复使用时,应先用滤纸过滤。

(5)95%乙醇固定液多次重复使用时,需测定其浓度比重,乙醇浓度低于90%时应予弃用。

2.滴加法:将固定液滴加于平放的干燥涂片上,应避免因固定液挥发造成沉淀。

(四)固定后未染色涂片的保存或邮寄:涂片固定15min后取出,立即滴加数滴甘油于涂膜上。对该涂片进行染色前,应先将其置于95%乙醇中溶去甘油。

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