快速石蜡包埋组织切片的制备.docxVIP

快速石蜡包埋组织切片的制备

㈠煮沸固定切片法

1.固定：切取大小适宜（厚度2mm）的组织块，尽快置入装有5～8ml10%中性4%甲醛的试管中煮沸1min，然后注入冷水中。

2.脱水

（1）将已经煮沸固定的组织块取出，用刀片将其厚度修切至1.5mm，随

即置入盛有5~8ml丙酮的试管中，煮沸2min，然后将丙酮倾弃。

（2）再向该试管中重新加入5~8ml丙酮并煮沸2min。如此重复3～4次。

3.浸蜡：将已经丙酮脱水的组织块由试管中取出，用吸水纸去除其表面液体，随即置入75~80℃熔化的石蜡中，待组织块下沉、不再出现气泡时（约需30s），即可包埋。

4.包埋、切片和染色。

（1）用热镊子将预制的蜡块表面熔化，埋入已经浸蜡的组织块。

（2）待埋入组织块的蜡块表面凝固后，即用载玻片轻压蜡块表面片刻，使

蜡块表面平整。

（3）将蜡块置入冰水中，使其变硬。

（4）迅速切片，裱片后用吸水纸去除载玻片上的水分。

（5）将载玻片用火焰烘干（勿距火焰太近）。

（6）迅速进行苏木精-伊红染色。

5.注意事项

（1）为了尽量缩短制片时间，必须预先做好有关准备工作，备齐取材用具、试管、固定液、丙酮、酒精灯、火柴（或其他引火器）、包埋用蜡块、载玻片和染色试剂等，放在固定部位待用。

（2）全部制片过程一般在20～25min内完成。

（3）制片后剩余组织块应作常规石蜡包埋切片染色，进一步诊断。

（4）含脂肪较多的组织，须经多次丙酮处理。

（5）用于组织固定、脱水、透明的试剂和浸蜡用的石蜡应及时过滤、更换。

（6）丙酮、乙醇、二甲苯等为易燃物，进行上述各项流程时，2m距离内不得存在明火。加温脱水和浸蜡过程必须应用隔水温箱，不得使用干烤箱操作。

㈡超声波快速处理仪石蜡切片法（参照有关厂商的说明书操作）。