T CNHIA 20—2025 马冷冻精液生产技术规程.pdfVIP

ICS65.020.30

CCSB43

团体标准

T/CNHIA20—2025

马冷冻精液生产技术规程

Technicalregulationsfortheproductionoffrozensemeninequine

2025-04-15发布2025-06-15实施

中国马业协会  发布

T/CNHIA20—2025

马冷冻精液生产技术规程

1范围

本文件规定了马冷冻精液生产过程及对实验室准备、采精、精液检查与处理、精液冷冻、冻精检测、

包装、冻精贮存及运输的技术要求。

本文件适用于马冷冻精液的生产。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T5458液氮生物容器

T/CNHIA19马人工授精技术规程

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

稀释液semendiluent

保护精子延长其存活时间及增加精液容量的液体。

3.2

种公马stallion

具有该品种的典型体型外貌，生长发育良好，身体健康，无遗传疾病，符合该品种对种公马的认定

要求，并获得品种认定及登记机构的种公马证书。

4实验室准备

4.1一次性耗材

采精前1h将一次性无菌耗材放入38℃无菌恒温干燥箱备用。

4.2器械消毒

采精筒（假阴道）每次使用前后，应使用流动的清水冲洗干净，用洁净纱布擦干后，再用75%酒精

消毒后自然晾干。

玻璃、金属器械应依次使用75%酒精消毒、生理盐水浸泡并多次冲洗后，置于烘干箱150℃高温烘干。

玻璃器皿使用前先用自来水浸泡，再用加有中性洗涤剂的温热溶液刷洗两次后冲洗干净，最后用蒸

馏水冲洗2 次，洗净后的玻璃器皿应光亮、内壁无水滴附着。洗净的玻璃器皿送入电热干燥箱，加热至

160℃后恒温60min,然后温度调至38℃备用。

凡与精液、马生殖器（道）直接接触的其他器械（耗材）应进行严格消毒后使用。

4.3仪器设备

采精前1h，恒温水浴锅水温设置为38℃；显微镜载物板温度调至38℃。

4.4配制稀释液

稀释液的配制方法参见附录A。

4.5实验室

采精前2h，擦拭操作台，清洁实验室地面，后用紫外线消毒灯45min。

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T/CNHIA20—2025

5采精

采精按照T/CNHIA19中第4章和第5章确立的程序进行操作。

6精液品质检查

精液品质检查按照T/CNHIA19中第6章规定的要求进行操作。

7精液处理

7.1离心

鲜精用特大容量离心机离心浓缩，根据种公马年龄选择转速（转速随种公马年龄增加而降低），一

般以600g～800g离心10min,用细管除去上清液，除去离心杯底部混有杂质的精液，保留纯精液。

7.2精子密度

取0.1 mL过滤后的纯精液，加入2.4 mL生理盐水，混匀后，使用精液密度测定仪测定并记录。

7.3稀释

使用精液密度测定仪测出所加稀释液总量，或计算得到所加稀释液总量，所加稀释液总量［（原

精液量*原精液密度*精子活力）/（目标冷冻密度/解冻后精子活力）］-原精液量*20%。

应逐级等温稀释，稀释过程中不应将稀释液快速倒入精液中，避免剧烈震荡。

将34℃的第一稀释液缓慢加入精液中摇匀，所加量［（所加稀释液总量+精液量）/2］-精液量，

将稀释管放入盛有34℃蒸馏水的烧杯中后再放置于4