3.1 课时1 重组DNA技术的基本工具（36页）.pptxVIP

3.1课时1重组DNA技术的基本工具

1.简单描述基因工程的概念和目的。2.说出基因工程所需的三种基本工具及各工具特点和作用。

怎样培养出具有抗虫性状的抗虫棉呢？我国是棉花的生产和消费大国，棉花在种植过程中常常会受到棉铃虫的侵袭，这会使棉花大量减产。大量施用农药不仅提高了生产成本，还可能造成农产品和环境的污染，如果能培育出自身能抵抗棉铃虫的棉花就能解决这个问题。棉花本身不具有“杀虫基因”，而苏云金杆菌有一种“杀虫基因”，它能通过编码产生抗虫蛋白来杀死棉铃虫。

一、基因工程的诞生和发展基因工程是指按照人们的愿望，通过转基因等技术赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。从技术操作层面看，由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术。1．基因工程的概念

番木瓜易受番木瓜环斑病毒的侵袭，被感染后产量大大下降。科学家通过精心设计，用“分子工具”培育出了转基因番木瓜。DNA双螺旋的直径只有2nm，对如此微小的分子进行操作，是一项非常精细的工作，更需要专门的“分子工具”。科学家用到了哪些“分子工具”？这些“分子工具”各具有什么特征呢？

分子运输车分子手术刀分子缝合针准确切割DNA分子将体外重组好的DNA分子导入受体细胞将DNA片段再连接起来

一、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”阅读课本71页，完成学案任务一1．定义：切割DNA分子的工具是限制性内切核酸酶，又称限制酶。2．来源：主要从原核生物中分离纯化出来的。3．作用特点：能够专一性识别双链DNA分子的特定核苷酸序列；使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。4．作用结果：通常有两种形式，黏性末端和平末端。？

EcoRI限制酶5′GAATTC3′

（1）黏性末端限制酶在它识别序列的中心轴线两侧，将DNA分子的两条链分别切开时，产生的是黏性末端。

（2）平末端限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时，产生的是平末端。

在下列（课本73页）DNA序列中，找到EcoRI限制酶的识别序列，用笔模拟它对DNA片段的切割，以获得目的基因。1．EcoRI限制酶的识别序列是什么？在哪两个碱基之间进行切割？2．切割后产生的黏性末端是什么？想要获得目的基因，需切割几次？模拟活动15′GAATTC3′G与A之间切割5′AATT3′切割2次5‘—TCCTAGAATTCTCGGTATGAATTCCATAC—3’3‘—AGGATCTTAAGAGCCATACTTAAGGTATG—5’

苏云金杆菌Bt基因（抗虫基因）5’3’3’5’某DNA片段5’3’3’5’你知道如何将Bt基因插入下面DNA片段中吗？用EcoRⅠ限制酶切割棉花DNA片段如何将他们连接起来呢？它们具有相同的黏性末端!5’3’3’5’

苏云金杆菌Bt基因（抗虫基因）5’3’3’5’用EcoRⅠ限制酶切割棉花DNA片段如何将他们连接起来呢？DNA连接酶—“分子缝合针”它们具有相同的黏性末端!恢复被限制酶切开的磷酸二酯键完全互补的黏性末端能通过氢键暂时连接在一起，但并不稳定。

二、DNA连接酶——“分子缝合针”阅读课本72页的内容，完成任务二类型来源特点E.coliDNA连接酶大肠杆菌连接具有平末端的双链DNA片段的效率很低T4DNA连接酶T4噬菌体既能连接双链DNA片段互补的黏性末端，也能连接双链DNA片段的平末端

DNA连接酶:一种能够将两个DNA片段连接起来的酶DNA聚合酶:将单个核苷酸连接到已有的DNA片段上它们有什么相同点？都可催化形成磷酸二酯键。化学本质都是蛋白质。

三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”将外源基因送入受体细胞，还需要有运输工具，这就是分子运输车，又叫载体或运载体。作用作为运输工具，将目的基因转移到受体细胞内。外源基因很难进入细胞，进入后也不容易稳定存在并表达，怎么解决这个问题呢？

（1）载体要与外源基因连接，需要具备什么条件？具有一个至多个限制酶切割位点供外源DNA片段插入。（2）要使携带的外源基因在受体细胞中稳定存在，需要具备什么条件？能在受体细胞内进行自我复制，或整合到受体DNA上，随受体DNA同步复制。（3）为了便于筛选重组DNA分子，载体需要具备什么条件？具有标记基因，用于筛选含重组DNA分子的细胞。常见的标记基因有四环素抗性基因、氨苄青霉素抗性基因等。注意：载体需对受体细胞无害，不影响受体细胞的正常生命活动。结合课本72-73页，小组讨论，回答任务三的问题

3．载体的种类（1）质粒（2）噬菌体（3）动植物病毒它们的来源不同，在大小、结构、复制方式以及可以插入外