基因工程制药课件.pptVIP

基因工程制藥基因工程的基礎知識第一節基因的概念與特性一、基因的概念:DNA分子中含有特定遺傳資訊的一段核苷酸序列,是遺傳物質的最小功能單位。早期認為遺傳物質是蛋白質，1944年Avery從肺炎鏈球菌轉化實驗證明是DNA。二、基因的一般特性：①基因可自我複製，②基因決定蛋白質結構，③基因可突變。基因按功能分為：①結構基因②調控基因三、DNA的結構與性能⒈DNA的結構：四種核苷酸（ATCG）連接。DNA二級結構雙螺旋結構。⒉DNA的性質與功能①吸收光譜260②電場中泳動③變性複性雜交第二節DNA的複製與表達一、DNA的複製：半保留複製二、基因表達⒈轉錄：在RNA聚合酶的催化下以DNA為範本合成mRNA的過程。轉錄後加工：剪切：除去內含子加帽：5’加m7Gppp加尾：3’加poly（A）二、翻譯：以mRNA為範本,tRNA作為運載工具,將活化的氨基酸在核糖體上合成蛋白質的過程。⒈分為三個階段：①起始②延長③止基因表達真核細胞的翻譯過程⒉翻譯後的肽鏈加工肽鏈切斷①羥基化②糖基化③磷酸化④乙醯化基因工程制藥第一節概述20世紀70年代基因工程誕生最先應用在醫藥科學領域。1982年第一個基因工程產品--人胰島素在美國問世。優點:大量生產、應用臨床、深入研究、擴大應用、改造不足。第二節基因工程藥物生產的基本過程基因工程技術是將重組對象的目的基因插入載體，拼接後轉入新的宿主細胞，構建成工程菌(或細胞），實現遺傳物質的重新組合，並使目的基因在工程菌內進行複製和表達的技術。基因工程基本過程基因工程藥物制藥的主要程式:⒈目的基因的克隆，⒉構建DAN重組體，⒊DAN重組體轉入宿主菌，⒋構建工程菌，⒌工程菌發酵，⒍表達產物的分離純化，⒎產品的檢驗等。基因工程藥物制藥的主要程式獲得目的基因組建重組質粒構建工程菌（或細胞）培養工程菌產物分離純化除菌過濾半成品檢定成品檢定包裝第三節目的基因的獲得克隆真核基因常用方法：逆轉錄法和化學合成法。一、逆轉錄法逆轉錄法就是先分離純化目的基因的mRNA，在反轉錄成cDNA，然後進行cDNA的克隆表達。