基因表达的调控课件.pptVIP

16.2.1操縱子(operon)細菌能隨環境的變化，迅速改變某些基因表達的狀態，這就是很好的基因表達調控的實驗模型。人們就是從研究這種現象開始，打開認識基因表達調控分子機理的窗口的。操縱子的提出大腸桿菌可以利用葡萄糖、乳糖、麥芽糖、阿拉伯糖等作為碳源而生長繁殖，當培養基中含有葡萄糖和乳糖時，細菌優先利用葡萄糖，當葡萄糖耗盡，細菌停止生長，經過短時間的適應，就能利用乳糖，細菌繼續呈指數式繁殖增長。乳糖對?－半乳糖苷酶的合成有誘導作用。葡萄糖對?－半乳糖苷酶的合成有抑制作用。這種典型的誘導現象，是研究基因表達調控極好的模型。針對大腸桿菌利用乳糖的適應現象，法國的Jocob和Monod等人做了一系列遺傳學和生化學研究實驗，於1961年提出乳糖操縱子（lacoperon）學說。16.2.1.1操縱子的基本組成下麵就以乳糖操縱子為例子說明操縱子的最基本的組成元件（elements）。PS1S2S3啟動子OPromoter調控序列結構基因操縱子（operon）結合RNA聚合酶表達功能蛋白?11/50操縱子（operon）:原核生物的轉錄單位操縱基因Operator(1)结构基因群操縱子中被調控的編碼蛋白質的基因可稱為結構基因(structuralgene,SG)。一個操縱子中含有2個以上的結構基因，多的可達十幾個。乳糖操縱子含有ｚ、ｙ和ａ3個結構基因。(2)启动子啟動子(promoter,P)是指能被RNA聚合酶識別、結合並啟動基因轉錄的一段DNA序列。操縱子至少有一個啟動子，一般在第一個結構基因5＇側上游，控制整個結構基因群的轉錄。(3)操縱區操縱區（operator）是指能被調控蛋白特異性結合的一段DNA序列，常與啟動子鄰近或與啟動子序列重疊，當調控蛋白結合在操縱子序列上，會影響其下游基因轉錄的強弱。以乳糖操縱子中的操縱區為例，其操縱區（o）序列位於啟動子（p）與被調控的基因之間，部分序列與啟動子序列重疊。（4）調控基因調控基因(regulatorygene)是編碼能與操縱序列結合的調控蛋白的基因。調控蛋白有：A阻遏蛋白(repressiveprotein)：與操縱區結合後能減弱或阻止其調控的基因轉錄，其介導的調控方式為負調控B啟動蛋白(activatingprotein)：與操縱區結合後能增強或起動其調控的基因轉錄，所介導的調控方式為正調控例如在乳糖操縱子中，調控基因lacI位於Plac鄰近，編碼產生調控蛋白R。在環境沒有乳糖存在的情況下，R能特異性與操縱區ｏ緊密結合，從而阻止利用乳糖的酶類基因的轉錄，所以R是乳糖操縱子的阻遏蛋白；當環境中有足夠的乳糖時，乳糖與R結合，失去與操縱區特異性緊密結合的能力，從而解除了阻遏蛋白的作用，使其後的基因有轉錄的可能。在這過程中乳糖就是誘導劑，與R結合起到去阻遏作用，誘導了利用乳糖的酶類基因轉錄開放。許多調控蛋白都是變構蛋白（allostericprotein），通過與上述類似的方式與效應物結合改變空間構像，從而改變活性，起到調節基因轉錄表達的作用。（5）終止子終止子（terminator，T）是給予RNA聚合酶轉錄終止信號的DNA序列。在一個操縱子中至少在結構基因群最後一個基因的後面有一個終止子。以上5種元件是每一個操縱子必定含有的。其中啟動子、操縱區位於緊鄰結構基因群的上游，終止子在結構基因群之後16.2.1.1乳糖操縱子的表達調控1.阻遏蛋白的負調控當大腸桿菌在沒有乳糖的環境中生存時，lac操縱子處於阻遏狀態。調節基因在其自身的啟動子Pi控制下，低水準、組成性表達產生阻遏蛋白R，R與操縱子ｏ結合，阻礙了RNA聚合酶與啟動子Plac的結合，阻止了基因的轉錄啟動。當有乳糖存在時，乳糖受?－半乳糖苷酶的催化轉變為別乳糖，與R結合，使R構象變化，失去與ｏ的親和力，與ｏ解離，基因轉錄開放，使?－半乳糖苷酶在細胞內的含量可增加1000倍。這就是乳糖對lac操縱子的誘導作用。2.CAP的正調控葡萄糖存在時，半乳糖-糖苷酶等的合成也受抑制。CAP：能與cAMP特異結合的cAMP受體在lac操縱子的啟動子Plac上游端有一段序列與Plac部分重疊的序列，能與CAP特異結合，稱為CAP結合位點（C