基于PI3K_Akt_NF-κB信号通路探讨商陆果发酵液体外抗肝癌作用.docxVIP

·论著·

基于PI3K/Akt/NF-κB信号通路探讨商陆果发酵液体外抗肝癌作用

李艳1，李慧敏1，齐英1，曾元宁1，王秋红1,2*(1.广东药科大学中药学院，广州510006；2.黑龙江中医药大学教育部北药基础与应用研究重点实验室/黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室，哈尔滨150040)

摘要：目的基于磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol3-kinase，PI3K)/蛋白激酶B(proteinkinaseB，Akt)和核转录因子(nuclearfactor，NF)-κB信号通路探讨商陆果发酵液及其组分对Bel-7402肝癌细胞的作用。方法采用超声提取、乙醇醇沉、阳离子交换树脂以及大孔吸附树脂柱色谱分离技术将商陆果发酵液进行分离。以人肝癌细胞Bel-7402为研究对象，采用细胞活力检测试剂盒(cellcountingkit-8，CCK8)法考察商陆果发酵液及其组分对其增殖能力的影响，以获得主要药效物质以及合适剂量用于后续实验。利用平板克隆形成试验、细胞划痕试验、流式细胞术以及蛋白质印迹法检测生物碱组分对Bel-7402肝癌细胞克隆形成能力、迁移能力、凋亡和周期的影响及其作用机制。结果相同浓度梯度下，商陆果发酵液生物碱组分抑制Bel-7402肝癌细胞增殖效果最佳，IC50浓度在0.75mg·mL?1左右，即选择0.375、0.75、1.5mg·mL?1的生物碱作为后续实验低、中、高剂量组。后续实验发现生物碱组分可以降低Bel-7402肝癌细胞的克隆形成能力和迁移能力，促进细胞凋亡，阻滞细胞于S期和G2/M期。进一步研究发现，生物碱组分能上调Bel-7402肝癌细胞中p53蛋白和促凋亡蛋白Bax表达水平，下调PI3K、Akt、NF-κBP65、环氧化酶2(cyclooxygenase2，COX-2)、血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平，导致Bax/Bcl-2比率增加。结论商陆果发酵液体外治疗肝癌主要药效物质基础是生物碱组分，其可能通过抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路活化，进而增加Bax/Bcl-2比值来促进细胞凋亡和下调VEGF抑制细胞增殖，从而发挥抗肿瘤作用。

关键词：商陆果发酵液；Bel-7402肝癌细胞；周期阻滞；PI3K/Akt/NF-κB信号通路

中图分类号：R285.5文献标志码：A文章编号：1007-7693(2025)05-0697-09

DOI:10.13748/ki.issn1007-7693引用本文：李艳,李慧敏,齐英,等.基于PI3K/Akt/NF-κB信号通路探讨商陆果发酵液体外抗肝癌作用[J].中国现代应用药学,

2025,42(5):697-705.

ExploringtheAnti-HepatomaEffectofFermentationLiquorofFreshFruitofPhytolaccaAcinosaRoxb.inVitroBasedonPI3K/Akt/NF-κBSignalingPathway

LIYan1,LIHuimin1,QIYing1,ZENGYuanning1,WANGQiuhong1,2*(1.CollegeofTraditionalChineseMedicine,GuangdongPharmaceuticalUniversity,Guangzhou510006,China;2.KeyLaboratoryofNorthMedicineFoundationandApplicationResearch,MinistryofEducation/HeilongjiangKeyLaboratoryofPharmacodynamicSubstancesofTraditionalChineseMedicineandNaturalMedicines,HeilongjiangUniversityofTraditionalChineseMedicine,Harbin150040,China)

ABSTRACT:OBJECTIVE