罗汉果中8种罗汉果皂苷的含量测定液相色谱-串联质谱法.docxVIP

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罗汉果中8种罗汉果皂苷的含量测定

液相色谱-串联质谱法

1范围

本文件规定了罗汉果中8种罗汉果皂苷含量的液相色谱-串联质谱测定方法。

本文件适用于罗汉果中罗汉果皂苷Ⅱe、罗汉果皂苷Ⅲ、罗汉果皂苷Ⅳ、罗汉果皂苷Ⅳa、

赛门苷Ⅰ、罗汉果皂苷Ⅴ、异罗汉果皂苷Ⅴ和11-O-罗汉果皂苷Ⅴ等8种罗汉果皂苷含量的测定，其他罗汉果产品可参考执行。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期

的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1罗汉果皂苷Mogrosides

罗汉果皂苷是以罗汉果醇为母核经糖基化修饰后形成的一系列葫芦烷型四环三萜皂苷

化合物，包括罗汉果皂苷Ⅱe、罗汉果皂苷Ⅲ、罗汉果皂苷Ⅳ、罗汉果皂苷Ⅳa、赛门苷Ⅰ、罗汉果皂苷Ⅴ、异罗汉果皂苷Ⅴ和11-O-罗汉果皂苷Ⅴ等。

4符号

本文件没有需要特别说明的符号。

5原理

罗汉果样品中的罗汉果皂苷类化合物用甲醇水溶液超声提取,采用高效液相色谱-串联质谱仪测定,外标法定量。

6试剂和材料

除非另有规定,所有试剂均为分析纯。

6.1试剂

6.1.1水:GB/T6682,一级。

6.1.2甲醇(CH4O):色谱纯。

6.1.3乙腈(C2H3N):色谱纯。

2

6.1.4甲酸(CH2O2):色谱纯。

6.2试剂配制

6.2.180%甲醇溶液:取80mL甲醇,加水定容至100mL,混匀。

6.3标准品

罗汉果皂苷类化合物标准品:相关信息见表1,纯度不低于98%。

表1罗汉果皂苷类化合物标准品基本信息表

序号

中文名称

英文名称

分子量

CAS号

1

罗汉果皂苷IIe

MogrosideIIe

801.01

88901-38-6

2

罗汉果皂苷III

MogrosideIII

963.15

130567-83-8

3

赛门苷I

SiamenosideI

1125.30

126105-12-2

4

罗汉果皂苷IV

MogrosideIV

1125.30

89590-95-4

5

罗汉果皂苷IVa

MogrosideIVa

1125.30

88901-41-1

6

罗汉果皂苷V

MogrosideV

1287.43

88901-36-4

7

11-O-罗汉果皂苷V

11-oxo-mogrosideV

1285.42

126105-11-1

8

异罗汉果皂苷V

IsomogrosideV

1287.43

1126032-65-2

6.4标准溶液配制

6.4.1罗汉果皂苷类化合物标准储备液:准确称取8种(表1)待测物质的标准品,用甲醇溶解后,加入80%甲醇溶液定量稀释,制成高浓度单标准品储备液。分别移取一定量的8种单标准品储备液于25mL容量瓶,80%甲醇溶液定容,制成0.1mg/mL的母液作为标准品储备液。避光2~4℃以下保存,备用。

6.4.2罗汉果皂苷类化合物混合标准溶液:用80%甲醇溶液对0.1mg/mL的母液稀释配成不同浓度的混合标准溶液用于绘制标准曲线。混合标准溶液应现用现配。

7仪器设备

7.1超高效液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源(ESI)。

7.2电热鼓风干燥箱：温度50℃~330℃,功率3.1kW。

7.3超声波清洗器：超声输人功率300W。

7.4离心机：转速不低于7500r/min。

7.5不锈钢粉碎机：细度50目~300目,功率1.4kW。

7.6天平：感量0.001g和0.0001g。

7.7微量移液器：10μL~100μL和100μL~1000μL。

8试样制备

8.1试样制备

将罗汉果样品混合均匀，分出0.5kg作为试样，用粉碎机粉碎并通过孔径20目筛。混匀密封，并做标记。

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8.2试样提取

称取罗汉果粉末0.5g(精确至0.0001g),置于50mL离心管中,加人25mL80%甲醇溶

液，室温下超声提取30min。于7500r/min离心5min,将上清液转移至100mL容量瓶中。沉淀物再用80%甲醇溶液重复提取一次，在相同条件下离心5min,合并上清液,80%甲醇溶液定容至100mL。上样前,采用0.22