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2025年pcr核酸检测培训考试及的答案

一、单项选择题（每题2分，共30题，合计60分）

1.PCR技术的全称是：

A.聚合酶循环反应

B.聚合酶链式反应

C.核酸聚合反应

D.链式核酸扩增反应

答案：B

2.荧光定量PCR中，TaqMan探针的工作原理是基于：

A.探针5端荧光基团被Taq酶水解

B.双链DNA与荧光染料结合发光

C.引物二聚体产生荧光信号

D.模板链与探针杂交后自发荧光

答案：A

3.进行新冠病毒核酸检测时，若标本为咽拭子，其保存液应选择：

A.生理盐水

B.10%甲醛溶液

C.病毒保存液（含胍盐）

D.75%乙醇

答案：C

4.PCR实验室的“四区”不包括：

A.试剂准备区

B.标本处理区

C.扩增产物分析区

D.废弃物处理区

答案：D

5.荧光定量PCR中，Ct值的定义是：

A.荧光信号达到设定阈值时的循环数

B.扩增反应结束时的荧光强度峰值

C.引物与模板结合的温度

D.反应体系中dNTP的消耗速率

答案：A

6.核酸提取过程中，若标本溶血严重，可能导致：

A.提取的核酸浓度降低

B.扩增效率提高

C.Ct值明显减小

D.无扩增曲线

答案：A

7.实验室进行PCR检测时，阴性对照出现扩增曲线，最可能的原因是：

A.引物特异性差

B.模板量过高

C.移液器未校准

D.实验区域交叉污染

答案：D

8.以下哪种物质不会抑制PCR反应？

A.血红蛋白

B.肝素

C.EDTA

D.dNTP

答案：D

9.引物设计时，GC含量建议控制在：

A.10%-20%

B.20%-30%

C.40%-60%

D.70%-80%

答案：C

10.核酸提取后进行定量，若OD260/OD280比值为1.2，提示：

A.核酸纯度高

B.蛋白质污染

C.苯酚残留

D.RNA降解

答案：B

11.新冠病毒核酸检测中，若检测靶标为ORF1ab和N基因，结果判读为ORF1ab（+）、N（-），应：

A.直接报告阳性

B.报告阴性

C.重复检测并核查试剂

D.记录为灰区结果

答案：C

12.PCR扩增仪的温度校准应至少：

A.每月1次

B.每季度1次

C.每半年1次

D.每年1次

答案：C

13.生物安全柜使用时，正确的操作是：

A.手臂快速进出柜内

B.柜内物品摆放超过前窗操作口

C.操作结束后立即关闭风机

D.操作前开启紫外灯照射30分钟

答案：D

14.处理含新冠病毒的标本时，实验室人员应穿戴：

A.工作服+一次性手套

B.N95口罩+医用防护服+双层手套+护目镜

C.普通外科口罩+隔离衣

D.防水围裙+乳胶手套

答案：B

15.若PCR扩增曲线出现“平台期消失”，可能的原因是：

A.模板量过高

B.引物浓度过低

C.反应时间过长

D.荧光阈值设置过低

答案：B

16.核酸提取过程中，磁珠法与柱提法的主要区别是：

A.磁珠法无需离心

B.柱提法提取效率更高

C.磁珠法适用于大体积标本

D.柱提法成本更低

答案：A

17.实验室发生标本洒漏时，应立即：

A.用纸巾擦拭后丢弃

B.用75%乙醇覆盖10分钟后清理

C.用含有效氯2000mg/L的消毒液覆盖30分钟后清理

D.直接用清水冲洗

答案：C

18.以下哪种情况会导致假阴性结果？

A.标本采集部位不准确（如咽拭子未接触扁桃体）

B.扩增仪温度偏高0.5℃

C.探针浓度过高

D.阳性对照Ct值偏低

答案：A

19.荧光定量PCR的标准曲线斜率应为：

A.-3.1~-3.6

B.-2.0~-2.5

C.-4.0~-4.5

D.-1.0~-1.5

答案：A

20.实验室记录应保存至少：

A.1年

B.2年

C.3年

D.5年

答案：D

21.进行RNA检测时，若未使用RNase抑制剂，可能导致：

A.DNA污染

B.RNA降解

C.扩增效率提高

D.Ct值减小

答案：B

22.引物二聚体的形成主要与以下哪项有关？

A.引物GC含量过低

B.引物3端互补

C.模板浓