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第31卷分析化学(FENXIHUAXUE)研究简报第7期

2003年7月ChineseJournalofAnalyticalChemistry860—864

高效毛细管电泳前沿分析法研究酸性药物那格列奈

与人血浆白蛋白的结合

赵燕燕¨杨更亮范子琳王德先陈义

‘(河北省职工医学院实验中心，保定071000)(河北大学化学与环境科学学院，保定071002)

’(中国科学院化学研究所分子科学中心，北京100080)

摘要用高效毛细管电泳前沿分析法研究了酸性药物那格列奈与人血浆白蛋白的结合常数、结合位点和

结合率。使用未涂层的毛细管柱(4oCnlx50i．d．；有效柱长32cm)，磷酸盐缓冲溶液(pH7．4，离子强度

0．17)为背景溶液，在紫外检测波长214nm、运行电压18kv和重力进样100s的条件下，利用那格列奈谱峰的

平台高度和游离药物浓度的良好线性关系(r0．999，n=6)，测定了那格列奈的游离药物浓度。固定药物浓

度(2oottmol／L，250tanol／L)，考察不同的蛋白质浓度对结合的影响；固定蛋白质浓度(100L)，考察不同的

药物浓度对结合的影响。实验数据采用非线性拟和程序进行处理，得到了那格列奈的蛋白质结合参数。高效

毛细管电泳前沿分析法测定的数据重现性良好(RSD2．5％，n=3)，在药代动力学和药效学研究方面具有简

便、准确的优点。

关键词酸性药物，那格列奈，蛋白结合参数，毛细管电泳／前沿分析

1引言

药物分子与生物体内的聚合体，特别是与血浆蛋白之间的相互作用，直接影响药物在体内的分布以

及药物的药效学性质和药代动力学性质，成为药学和分析化学领域中研究的热点问题。基于高效液相

色谱法(HPLc)和分光光度法的传统的研究方法如平衡渗滤法、动力透析法和超过滤法，需要样品量较

多，在样品预处理过程中存在较多问题…。Sebille等将色谱中的Humme1．Dreyer法、空峰法(vacancy

peak)以及前沿分析法(FA，frontalanalysis)CM用于药物与蛋白结合的研究中；Amini等将区段灌注技术

(partialnnhagtechnique)用于此项研究，不需样品预处理直接进样。Poppe等又将这些技术融人了区

带毛细管电泳(CZE，capillaryzoneeletrophoresis)，可以满足微量样品的分析。目前，在药物与蛋白结

合的研究中，高效毛细管电泳前沿分析法(CE／FA)已成为具有吸引力的技术。CE／FA兼顾了FA和毛细

管电泳(CE，capillaryeletrophoresis)的特点，克服了传统分析方法的缺陷；适于体液环境中药物和蛋白的

分离，同时测得游离药物浓度和总药物浓度，有着广泛的应用前景。用CE／FA法进行碱性药物与蛋

白结合的研究已有许多报道，但很少涉及酸性药物。本文利用CE／FA法研究了酸性药物那格列奈与

人血浆白蛋白(HPA)的相互作用；对药物和蛋白结合规律进行了分析。

那格列奈(nateglinide)是一种新型的治疗II型糖尿病的药物。它与血浆蛋白结合的研究，对其在临

床应用中剂量的调整及在与其他药物合用时的相互作用的研究方面有着十分重要的意义。

2实验部分

2．1试剂和材料

那格列奈(nateglinide，Ngh，河北冀衡药业公司)，人血浆白蛋白(HPA，三九集团湛江开发区双林药

业有限公司)。实验用试剂均为分析纯，水为二次重蒸馏水。磷酸盐缓冲溶液(pH=7．4，离子强度

I=0．17)作为背景缓冲溶液及样品溶媒。所用溶液均通过0．45m纤维素酯微孔滤膜过滤。Na2I-IPO,

为52．58mmol／L，NaH2PO,为12．33mm