燕麦品种鉴定技术规程 SNP分子标记法.docxVIP

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ICS

FORMTEXT65.020.01

CCS

FORMTEXTB20

FORMTEXT63

FORMTEXT青海省地方标准

DBFORMTEXT63/TFORMTEXTXXXX—FORMTEXT2025

FORMTEXT

FORMTEXT燕麦品种鉴定技术规程SNP分子标记法

FORMTEXT点击此处添加标准名称的英文译名

FORMDROPDOWN

FORMTEXT

FORMDROPDOWN

FORMTEXTXXXX-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX发布

FORMTEXTXXXX-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX实施

FORMTEXT青海省市场监督管理局??发布

STYLEREF标准文件_文件编号DB63/TXXXX—2025

STYLEREF标准文件_文件编号DB63/TXXXX—2025

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前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由青海省农业农村厅提出并归口。

本文件起草单位：中国科学院西北高原生物研究所、青海省农作物种子站、青海省饲草料技术推广站、青海省乡村产业发展指导中心、海南州农牧业综合服务中心、青海天兴草业有限公司、青海省农业农村能源与资源保护技术指导服务中心。

本文件主要起草人：王寒冬、徐金青、沈裕虎、王蕾、边海燕、杨彩凤、侯留飞、王健斌、陈同睿、李春桥、唐有林、陈永祥、曹占英、张国军、汪忠善、任阳阳。

本文件由青海省农业农村厅监督实施。

燕麦品种鉴定技术规程SNP分子标记法

范围

本文件规定了燕麦品种鉴定SNP分子标记法的相关术语和定义、缩略语、主要仪器设备及试剂、溶液配制、推荐引物、操作程序、数据记录、结果判定等技术要求。

本文件适用于燕麦品种和种质资源的鉴定。

规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T3543.2农作物种子检验规程扦样

GB/T3543.4农作物种子检验规程发芽试验

GB4404.1粮食作物种子第1部分：禾谷类

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T19495.3转基因产品检测核酸提取纯化方法

GB/T30988多酚类植物基因组DNA提取纯化及测试方法

GB/T34265Sanger法测序技术指南

术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

SNP?标记

基于单核苷酸多态性的分子标记。

推荐引物

用本文件进行品种和种质资源鉴定时选用的一套SNP引物。

等位变异

同源染色体同一基因位点上存在的不同等位基因形式。

参照品种

具有所用SNP位点上不同等位变异的品种。

缩略语

下列缩略语适用于本文件。

CTAB：十六烷基三甲基溴化铵（cetyltrimethylammoniumbromide）

DNA：脱氧核糖核酸（deoxyribonucleicacid）

dNTPs：脱氧核糖核苷三磷酸（deoxy-ribonucleosidetriphosphates）

EDTA：乙二胺四乙酸（ethylenediaminetetraaceticacid）

PCR：聚合酶链式反应（polymerasechainreaction）

SNP：单核苷酸多态性（singlenucleotidepolymorphism）

Taq酶：耐热DNA聚合酶（Taq-DNApolymerase）

TBE：三羟甲基氨基甲烷-硼酸盐-乙二胺四乙酸（Tris-borate-EDTA）

Tris：三羟甲基氨基甲烷[Tris(hydroxymethyl)methylaminomethaneTHAM]

燕麦品种鉴定技术流程

燕麦品种鉴定技术流程如图1所示。

燕麦品种鉴定技术流程图

主要仪器设备及试剂

主要仪器设备及试剂见附录A，所用试剂均为分析纯。本文件所使用的超纯水应符合GB/T6682的要求。

溶液配制

见附录B。

推荐引物

见附录C。

操作程序

样品准备

种子质量应符合GB4404.1粮食作物种子第1部分：禾谷类中对燕麦种子纯度的要求。各待检品种的分样应符合GB/T3543.2的规定。按照GB/T3543.4的规定进行发芽，发芽的籽粒数须大于等于50粒。植株长至三叶一