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疫苗菌毒种培育工岗位标准化操作规程

文件名称：疫苗菌毒种培育工岗位标准化操作规程

编制部门：

综合办公室

编制时间：

2025年

类别：

两级管理标准

编号：

审核人：

版本记录：第一版

批准人：

一、总则

本规程适用于疫苗菌毒种培育工作，旨在规范疫苗菌毒种培育过程中的操作流程，确保菌毒种培育质量，保障疫苗生产安全。通过制定标准化操作规程，提高工作效率，降低操作风险，确保疫苗菌毒种培育的准确性和稳定性。

二、操作前的准备

1.劳动防护用品：操作人员需穿戴符合国家标准的工作服、口罩、护目镜、手套等防护用品，确保个人安全。

2.设备检查：对培养箱、离心机、显微镜、无菌操作台等设备进行检查，确保其运行正常，功能完好。

3.环境要求：操作室需保持清洁、无尘、通风良好，温度控制在适宜范围（通常为18-25℃），相对湿度控制在40%-70%。

4.无菌操作：确保操作台面、器械等符合无菌操作要求，定期进行消毒处理。

5.原料准备：提前准备所需菌毒种、培养基、试剂等原料，并进行质量检查，确保原料合格。

6.工作记录：准备记录本，记录操作过程中的关键信息，包括时间、操作步骤、结果等，以便后续追溯和分析。

7.应急预案：熟悉并掌握突发事件应急预案，如菌毒种污染、设备故障等情况的处理流程。

三、操作步骤

1.准备工作：穿戴好防护用品，检查设备状态，确保无菌操作台清洁，准备好所有必需的培养基、试剂和菌毒种。

2.培养基制备：按照无菌操作规程，将培养基分装至培养皿中，放入培养箱中预培养，确保培养基无菌。

3.菌毒种接种：在无菌操作台中，使用无菌接种环取适量菌毒种，接种至预培养的培养基上。

4.培养与观察：将接种后的培养皿放入培养箱，根据菌毒种特性设定适宜的温度和湿度，定期观察菌落生长情况。

5.菌落纯化：对生长良好的菌落进行纯化，通过划线或稀释涂布法进行，确保菌种纯度。

6.菌毒种收获：当菌落达到适宜生长状态时，无菌操作下收获菌毒种，通常采用离心法收集菌体。

7.质量检测：对收获的菌毒种进行质量检测，包括形态学观察、生化鉴定等，确保菌毒种质量符合标准。

8.记录与保存：详细记录操作过程和结果，将合格的菌毒种保存于-80℃冰箱中，并定期检查保存状态。

9.清洁与消毒：操作结束后，对操作台、设备进行清洁和消毒，以防止交叉污染。

10.紧急处理：如遇污染或设备故障，立即停止操作，按照应急预案进行处理。

四、设备状态

1.良好状态：

-培养箱：温度和湿度稳定，运行噪音正常，无异常报警。

-离心机：启动和停止平稳，无振动，转速准确，运行平稳。

-显微镜：图像清晰，调焦顺畅，光源稳定，无故障。

-无菌操作台：风速均匀，无泄漏，操作面清洁，无积尘。

-灭菌器：工作正常，温度和时间控制准确，无故障报警。

-冷冻箱：温度稳定，无泄漏，开关正常，无异味。

2.异常状态：

-培养箱：温度波动大，湿度不均，有异常噪音或报警。

-离心机：启动或停止时出现振动，转速不稳定，有异常噪音。

-显微镜：图像模糊，调焦困难，光源不稳定，有故障指示。

-无菌操作台：风速不均，有泄漏，操作面有积尘或损坏。

-灭菌器：温度或时间控制不准确，有故障报警或异味。

-冷冻箱：温度不稳定，有泄漏，开关不灵敏，有异常噪音。

在操作过程中，应密切监控设备状态，一旦发现异常，应立即停止使用，进行故障排查和维修，确保设备处于良好状态，以保证实验结果的准确性和操作人员的安全。同时，定期对设备进行维护和校准，预防潜在问题。

五、测试与调整

1.测试方法：

-温度测试：使用温度计对培养箱、离心机等设备进行温度测试，确保设备运行温度符合设定标准。

-湿度测试：使用湿度计对培养箱、无菌操作台等设备进行湿度测试，确保湿度控制准确。

-转速测试：使用转速表对离心机进行转速测试，确保离心速度稳定。

-显微镜测试：通过显微镜观察菌落生长情况，检查图像清晰度和调焦性能。

-无菌操作台测试：检查无菌操作台的风速和泄漏情况，确保无菌操作环境。

-灭菌器测试：检查灭菌器的工作温度和时间，确保消毒效果。

2.调整程序：

-如果测试结果显示设备状态不佳，需进行以下调整：

-培养箱：调整温湿度控制器，修复或更换传感器。

-离心机：检查轴承和电机，必要时进行润滑或更换零件。

-显微镜：调整镜头和光源，确保图像清晰。

-无菌操作台：检查风机和过滤系统，清洗或更换滤网。

-灭菌器：调整温度和时间控制器，确保消毒效果。

-调整后，需重新进行测试，确认设备恢复至良好状态。

-记录测试和调整结果，以便追踪设备性能变化和问题解决情况。

-定期对设备进行预防性维护，以减少故障发生，延长设备使用寿命。

六、