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《基础分子生物学》复习题及答案

一、名词解释

1.半保留复制:DNA复制过程中,亲代双链DNA解开为两条单链,分别作为模板合成互补子链,形成的两个子代DNA分子各含一条亲代链和一条新合成链的复制方式。1958年Meselson-Stahl实验通过同位素标记(1?N/1?N)和密度梯度离心验证了该机制。

2.启动子:DNA分子中位于基因转录起始点上游,能被RNA聚合酶识别并结合,启动转录的一段保守序列。原核生物典型启动子含-10区(TATAAT,Pribnow盒)和-35区(TTGACA);真核生物核心启动子含TATA盒(-25~-30区)、CAAT盒(-75区)等元件。

3.密码子的简并性:多个不同密码子编码同一种氨基酸的现象。例如,亮氨酸可由UUA、UUG、CUU、CUC、CUA、CUG共6种密码子编码。简并性通过减少有害突变(如密码子第三位碱基改变可能不影响氨基酸)增强了遗传稳定性。

4.增强子:能远距离(可距启动子数千碱基)增强基因转录效率的顺式作用元件,具有组织特异性和方向/位置无关性(可在基因上下游或内含子中)。其作用机制是通过与转录激活因子结合,改变染色质构象或形成转录复合体桥接启动子。

5.RNA干扰(RNAi):小干扰RNA(siRNA)或微小RNA(miRNA)通过与靶mRNA互补结合,诱导mRNA降解或抑制其翻译的基因沉默机制。该过程依赖Dicer酶切割长双链RNA生成siRNA,或由miRNA前体加工形成miRNA,最终与RISC复合体结合发挥作用。

6.冈崎片段:DNA复制过程中,滞后链(不连续合成链)上由DNA聚合酶Ⅲ以5→3方向合成的短片段(原核生物约1000~2000nt,真核生物约100~200nt)。最终由DNA聚合酶Ⅰ切除引物、填补缺口,DNA连接酶连接成完整链。

7.操纵子:原核生物基因表达调控的基本单位,由启动子、操纵基因(operator)和多个功能相关的结构基因(如乳糖操纵子的lacZ、lacY、lacA)串联组成。通过调控蛋白(阻遏蛋白或激活蛋白)与操纵基因结合,实现转录的协同调控。

8.逆转录:以RNA为模板,在逆转录酶(依赖RNA的DNA聚合酶)催化下合成cDNA的过程。该过程违反传统中心法则(RNA→DNA),常见于逆转录病毒(如HIV)复制及真核生物端粒酶活性中。

9.核酶(ribozyme):具有催化功能的RNA分子,可催化RNA剪切(如四膜虫rRNA前体的自我剪接)、磷酸转移、肽键形成(如核糖体大亚基rRNA催化肽键合成)等反应。核酶的发现突破了“酶是蛋白质”的传统认知。

10.CpG岛:基因组中富含CG二核苷酸的区域(长度约0.5~2kb,GC含量>50%),通常位于基因启动子区。正常情况下CpG岛未甲基化,若发生异常甲基化(如肿瘤抑制基因启动子区),可导致基因沉默,与癌症等疾病密切相关。

二、简答题

1.简述DNA双螺旋结构的主要特征及其生物学意义

答:DNA双螺旋结构的主要特征包括:(1)两条反向平行的多核苷酸链(一条5→3,另一条3→5)围绕同一中心轴形成右手螺旋;(2)磷酸-脱氧核糖骨架位于外侧,碱基对(A-T,G-C)通过氢键连接位于内侧,A=T(2个氢键),G≡C(3个氢键);(3)螺旋直径2nm,每圈10个碱基对(B型DNA),螺距3.4nm;(4)存在大沟和小沟,是蛋白质(如转录因子)识别DNA序列的主要区域。

生物学意义:(1)碱基互补配对(A-T,G-C)为DNA复制(半保留复制)和遗传信息准确传递提供了分子基础;(2)双螺旋结构的稳定性(氢键、碱基堆积力)保证了遗传信息的长期储存;(3)大沟与小沟的存在允许蛋白质特异性结合,调控基因表达(如转录因子识别顺式作用元件)。

2.比较原核生物与真核生物DNA复制的主要差异

答:原核与真核DNA复制的差异主要体现在以下方面:(1)复制起点:原核生物(如大肠杆菌)为单一起点(OriC),真核生物为多个起点(人类约3×10?个);(2)复制子大小:原核复制子大(约4.6Mb),真核复制子小(约100~200kb);(3)参与酶类:原核DNA聚合酶主要为PolⅠ(修复)、PolⅡ(修复)、PolⅢ(复制),真核为Polα(引物合成)、Polδ(滞后链)、Polε(前导链);(4)引物长度:原核引物为RNA(约10nt),真核引物含RNA-DNA杂合片段(约10ntRNA+2~3ntDNA);(5)端粒处理:原核为环状DNA无末端问题,真核线性DNA需端粒酶(含RNA模板)延长端粒,防止染色体缩短;(6)复制速度:原核快(约1000nt/s),真核慢(约50nt/s),但多起点补偿总速度。

3.说明原核生物转录终

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