蛋白质的生物合成 .pptVIP

*端粒结构和端粒酶在真核生物基因组复制过程中的作用端粒---真核，由DNA和蛋白质组成生物染色体的末段结构端粒酶---逆转录酶，蛋白质和RNA组成，其RNA序列是复制端粒重复序列的模板，具有种属特异性5?3?3?3?3?5?5?5?*第30页，共45页，星期日，2025年，2月5日**第31页，共45页，星期日，2025年，2月5日*端粒结构是保持真核染色体DNA在复制过程中DNA的长度,保证染色体的稳定性.端粒DNA的长度变短可以导致细胞活性下降，细胞衰老；端粒酶活性过高，端粒DNA不停的延长，细胞不停分裂，有可能产生癌症。*第32页，共45页，星期日，2025年，2月5日蛋白质的生物合成*第1页，共45页，星期日，2025年，2月5日*大肠杆菌DNA聚合酶三类DNA聚合酶Ⅰ---多功能酶5’-3’*第2页，共45页，星期日，2025年，2月5日DNA聚合酶Ⅰ的功能5′?3′聚合作用5′?3′外切酶3′?5′外切酶活性功能：对复制中的错误进行校读，对复制和修复中出现的空隙进行填补，切除引物。*第3页，共45页，星期日，2025年，2月5日DNApolⅠ利用3′→5′外切活性切除错配的碱基，同时利用5′→3′聚合活性补回正确的核苷酸，这种功能称为即时校读(proofread)。DNApolⅠ的5′→3′外切酶作用可以与其聚合作用同时发生，产生缺口平移(nicktranslation)、链的置换及模板转辙现象。*第4页，共45页，星期日，2025年，2月5日碱基配对正确，DNApolⅠ无活性3′-5′外切活性5′-3′聚合活性DNApolⅠAGdCTPCG5′3′5′3′DNApolⅠ的即时校读功能*第5页，共45页，星期日，2025年，2月5日323个氨基酸小片段5????核酸外切酶活性大片段/Klenow片段604个氨基酸DNA聚合酶活性???5?核酸外切酶活性N端C端木瓜蛋白酶DNA-polⅠKlenow片段是实验室合成DNA，进行分子生物学研究中常用的工具酶。*第6页，共45页，星期日，2025年，2月5日5ucgagcuag-OH35ucgagcuagDNApoldNTP5′?3′聚合作用3agctcgatcgtagcctagcgtagcagtgcacgatc53agctcgatcgtagcctagcgtagcagtgcacgatc5catcggatcgcatcgtcacgtgctag3*第7页，共45页，星期日，2025年，2月5日5’3’内切酶外切酶外切酶与内切酶作用图解5′?3′外切酶活性的功能切除引物，切除突变片段5’3’*第8页，共45页，星期日，2025年，2月5日5′AGCTTCAGGATA?3′|||||||||||3′TCGAAGTCCTAGCGAC5′3??5?外切酶活性5??3?外切酶活性?能切除突变的DNA片段。能辨认错配的碱基对，并将其水解。DNA聚合酶Ⅰ的核酸外切酶活性*第9页，共45页，星期日，2025年，2月5日3’?5’外切酶活性校读错配碱基*第10页，共45页，星期日，2025年，2月5日模板聚合酶活性位点引物3′→5′外切酶位点*第11页，共45页，星期日，2025年，2月5日DNA-polⅡ（120kD）DNA-polII基因发生突变，细菌依然能存活。它参与DNA损伤的应急状态修复。*第12页，共45页，星期日，2025年，2月5日功能：原核生物复制延长中真正起催化作用的酶DNA-polⅢ(250kD)10种亚基组成的不对称异源二聚体*第13页，共45页，星期日，2025年，2月5日可滑动的夹持器亚基催化亚基3′→5′外切酶亚基前导链合成后随链合成夹持器装置催化亚基?亚基保持核心酶的二聚体结构*第14页，共45页，星期日，2025年，2月5日α亚基具有5′→3′方向合成DNA的催化活性ε