组培实验问题及对策.pptxVIP

项目四组培实验设计;任务3组培中常见问题及对策

;一、污染的原因及预防

二、褐变的原因及预防

三、玻璃化的原因及预防

四、其它;一、污染

;1、污染的含义：

指在组培过程中培养瓶内滋生菌斑，使培养材料不能正常生长发育，从而导致培养失败的现象。;2、污染原因（从病原菌分析）

（1）细菌污染：菌斑呈黏粘液状，界限比较明显，一般接种后1—2天即能发现。主要是大肠杆菌和链球菌。

（2）真菌污染：菌斑呈绒毛状、絮状，界限不明显，伴有不同颜色的孢子接种后3—10天才能发现。主要是霉菌污染。

;3、污染途径：

（1）外植体带菌

（2）培养基及接种器具灭菌不彻底

（3）接种操作时带入

（4）环境不清洁;4、污染的预防措施：

A、??防止外植体带菌

（1）选择好外植体采集时期和采集部位

●????外植体采集以春秋为宜；

●????优先选择地上部分作为外植体；

●????阴雨天勿采，晴天下午采集；

●????采前喷杀虫剂、杀菌剂或套塑料袋。

（2）室内或无菌条件下进行预培养。

（3）外植体严格灭菌灭菌效果实验多次灭菌和交替灭菌

;B、保证培养基及接种器具彻底灭菌

1．?分装时，注射器勿触瓶口。培养基勿粘瓶口

2．?检查封口膜是否破损

3．?扎瓶口要位置适当，松紧适宜

4．?保证灭菌时间和高压锅内温度

5．?接种工具用前彻底灭菌

6．?工