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生物技术人员考试题(附答案)

一、单项选择题（每题2分，共20分）

1.以下哪种酶在基因工程中常用于连接DNA片段的粘性末端或平末端？

A.限制性内切酶（EcoRI）

B.DNA聚合酶（Taq酶）

C.DNA连接酶（T4连接酶）

D.逆转录酶（M-MLV）

2.在PCR反应中，延伸阶段的温度通常设置为？

A.94-98℃

B.50-65℃

C.72℃左右

D.4℃

3.原核生物基因表达载体中，用于调控外源基因转录的关键元件是？

A.复制原点（ori）

B.抗生素抗性基因（如ampR）

C.启动子（如T7启动子）

D.多克隆位点（MCS）

4.以下哪种技术可用于检测特定RNA分子的表达水平？

A.SouthernBlot

B.NorthernBlot

C.WesternBlot

D.ELISA

5.植物体细胞杂交的关键步骤是？

A.原生质体融合

B.愈伤组织诱导

C.根芽分化

D.炼苗移栽

6.在SDS电泳中，SDS的主要作用是？

A.提供缓冲环境

B.破坏蛋白质的二硫键

C.使蛋白质带负电荷并变性

D.增加电泳的分辨率

7.以下哪种微生物是工业发酵生产青霉素的常用菌株？

A.大肠杆菌（E.coli）

B.酿酒酵母（S.cerevisiae）

C.产黄青霉（Penicilliumchrysogenum）

D.枯草芽孢杆菌（B.subtilis）

8.CRISPR-Cas9系统中，指导Cas9蛋白识别靶DNA序列的关键分子是？

A.tracrRNA

B.crRNA

C.sgRNA（单链向导RNA）

D.mRNA

9.动物细胞培养时，常用的消化液是？

A.胰蛋白酶

B.胃蛋白酶

C.纤维素酶

D.果胶酶

10.以下哪种方法可用于蛋白质的分离纯化？

A.梯度离心

B.凝胶过滤层析（分子筛）

C.分光光度法

D.荧光定量PCR（qPCR）

二、填空题（每空1分，共20分）

1.基因工程的核心步骤是__________和__________。

2.PCR反应的三个基本步骤是__________、__________和__________。

3.原核表达系统中最常用的宿主菌是__________，其优点是__________、__________，但无法对表达的蛋白质进行__________修饰。

4.植物组织培养的理论基础是__________，其培养基中需添加的两类关键植物激素是__________和__________。

5.单克隆抗体制备的技术基础是__________，融合的两种细胞分别是__________和__________。

6.生物信息学中，BLAST工具的主要功能是__________。

7.发酵过程中，溶解氧（DO）的控制对好氧微生物至关重要，常用的调节方法包括__________和__________。

三、简答题（每题8分，共32分）

1.简述限制性内切酶的分类及II型限制性内切酶的特点。

2.举例说明如何通过基因工程技术提高微生物的代谢产物产量（如抗生素）。

3.比较植物组织培养与动物细胞培养的培养基成分差异。

4.简述WesternBlot的主要步骤及各步骤的目的。

四、论述题（每题14分，共28分）

1.论述原核表达系统与真核表达系统（如酵母、哺乳动物细胞）在重组蛋白生产中的优缺点，并举例说明其应用场景。

2.以CRISPR-Cas9技术为例，论述基因编辑技术的作用机制、应用领域及潜在风险。

答案

一、单项选择题

1.C（DNA连接酶用于连接DNA片段）

2.C（延伸阶段温度为72℃左右，Taq酶最适温度）

3.C（启动子调控转录起始）

4.B（NorthernBlot检测RNA）

5.A（原生质体融合是体细胞杂交的关键）

6.C（SDS使蛋白质变性并带负电荷，消除电荷差异）

7.C（产黄青霉是青霉素生产菌株）

8.C（sgRNA指导Cas9识别靶序列）

9.A（胰蛋白酶消化细胞间连接蛋白）

10.B（凝胶过滤层析用于蛋白质分离）

二、填空题

1.目的基因获取；重组DNA分子构建

2.变性；退火（复性）；延伸

3.大肠杆菌（E.coli）；生长快；操作简单；糖基化（或翻译后）

4.细胞全能性；生长