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生物技术专业知识考试题(附答案)

一、单项选择题（每题2分，共20分）

1.以下关于限制性核酸内切酶的描述，错误的是（）

A.多数识别回文序列

B.切割后产生黏性末端或平末端

C.EcoRⅠ的切割位点位于G和A之间

D.只能从原核生物中分离获得

2.PCR反应中，引物的作用是（）

A.提供DNA合成的3-OH末端

B.激活Taq酶的活性

C.结合模板DNA的5端

D.防止DNA链复性

3.原核表达系统（如大肠杆菌）用于重组蛋白表达的优势不包括（）

A.遗传背景清楚

B.可进行复杂糖基化修饰

C.培养成本低

D.表达量高

4.单克隆抗体制备过程中，杂交瘤细胞的筛选依据是（）

A.细胞增殖能力

B.对HAT培养基的抗性

C.分泌抗体的特异性

D.细胞形态差异

5.以下不属于第二代测序技术（NGS）特点的是（）

A.高通量

B.单分子测序

C.短读长

D.边合成边测序

6.植物体细胞杂交的关键步骤是（）

A.原生质体融合

B.愈伤组织诱导

C.试管苗移栽

D.外植体消毒

7.关于CRISPR-Cas9系统的描述，正确的是（）

A.Cas9蛋白负责识别PAM序列

B.sgRNA仅包含crRNA部分

C.可实现定点基因敲除或敲入

D.只能在真核细胞中发挥作用

8.酶的固定化方法中，最易导致酶活性损失的是（）

A.吸附法

B.包埋法

C.共价结合法

D.交联法

9.发酵过程中，对数期的主要特征是（）

A.菌体数量增长缓慢

B.次级代谢产物大量积累

C.比生长速率最大

D.营养物质消耗殆尽

10.以下关于cDNA文库构建的描述，错误的是（）

A.需要提取细胞总RNA

B.以mRNA为模板合成cDNA

C.包含非编码区序列

D.可用于克隆表达型基因

二、填空题（每空1分，共20分）

1.基因工程的核心工具酶包括限制性核酸内切酶、__________和__________。

2.PCR反应的三个基本步骤是__________、__________和__________。

3.植物组织培养的理论基础是__________，其关键培养基成分包括__________和__________（填激素类型）。

4.单克隆抗体制备中，免疫的B淋巴细胞与__________细胞融合，形成的杂交瘤细胞需通过__________培养基筛选。

5.原核生物中常见的表达载体需包含__________、__________和终止子等元件。

6.蛋白质分离纯化的常用方法包括__________（基于电荷差异）、__________（基于分子大小）和__________（基于亲和力）。

7.第二代测序技术的核心流程包括__________、__________和数据拼接分析。

8.发酵工程中，根据微生物对氧气的需求，可分为__________发酵和__________发酵。

三、简答题（每题8分，共32分）

1.简述cDNA文库与基因组文库的主要区别。

2.说明植物细胞全能性的概念及其在生物技术中的应用实例。

3.列举重组蛋白在大肠杆菌中表达时可能遇到的问题及解决策略。

4.比较限制性核酸内切酶与CRISPR-Cas9系统在基因编辑中的特点。

四、论述题（每题14分，共28分）

1.结合实例论述基因编辑技术（如CRISPR-Cas9）的发展对农业和医学领域的影响。

2.从设计理念、技术手段和应用前景三个方面，阐述合成生物学与传统生物技术的差异。

参考答案

一、单项选择题

1.D（部分限制性内切酶可通过基因工程改造获得，不限于原核生物）

2.A（引物为DNA合成提供3-OH，Taq酶以此为起点延伸）

3.B（大肠杆菌为原核生物，无法进行真核生物的糖基化修饰）

4.B（HAT培养基中，未融合的亲本细胞因缺乏HGPRT或TK酶无法存活，杂交瘤细胞可通过互补途径存活）

5.B（单分子测序属于第三代测序技术，如PacBio）

6.A（原生质体融合是实现不同物种遗传物质整合的关键步骤）

7.C（Cas9通过sgRNA引导识别靶序列，PAM为NGG，可在原核或真核细胞中应用）

8.C（共价结合法通过化学键将酶与载体连接，可能破坏酶的活性中心）

9.C（对数期菌体以最大比生长速率增殖，代谢活跃）

10.A（cDNA文库构建需