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革兰氏染色技术第九章微生物实训
实验目的由于细菌个体微小,基本上无色透明,故将其用适当染料染色观察,方能显示它的形态、大小、构造及染色特性等,在细菌鉴别上有重要意义。
实验原理G﹢菌:细胞壁厚,肽聚糖网状分子形成一种透性屏障,当乙醇脱色时,肽聚糖脱水而孔隙缩小,故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。Gˉ菌:肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,其脂含量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫-碘复合物溶出细胞壁,番红染液复染后呈红色。
实验原理
实验材料123456①菌种(大肠杆菌,金黄色葡萄球菌)②酒精灯③接种环④革兰氏染液(结晶紫、碘液、酒精、番红)⑤载玻片⑥光学显微镜
实验步骤
①每次染色后必须水洗:斜置载玻片,在自来水龙头下用小股水流冲洗,直至洗下的水呈无色为止。②脱色后须立即水洗,防止过度脱色。革兰染色法:初染(结晶紫)媒染(碘液)脱色(95%乙醇)复染(番红)1min1min30s
实验结果通过光学显微镜观察细菌细胞染色情况:细胞呈红色的为革兰氏阴性菌;呈紫色的为革兰氏阳性菌,记录实验结果完成实验报告革兰氏阴性菌革兰氏阳性菌
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