1021 细菌DNA特征序列鉴定法 对比表_Decrypted.pdfVIP

取消新增修订

《中国药典》1021细菌DNA特征序列鉴定法：2020年版VS2025年版对比表

标题2020年版2025年版

细菌DNA特征序列鉴定法系以特征核酸序列作为目标检测物，用于药用原

细菌DNA特征序列鉴定法系以特征核酸序列作为目标检测物，用于药用原料、辅料、制药用水、中间产品、终产品、包装材料和环境等药品全生命

料、辅料、制药用水、中间产品、终产品、包装材料和环境等药品全生命周期质量控制中细菌的鉴定。

周期质量控制中细菌的鉴定。本法通过对细菌16S核糖体RNA(16SribosomalRNAgene，16SrRNA)基

本法通过对细菌16S核糖体RNA(16SribosomalRNAgene，16SrRNA)基因特征核酸序列的测定及对比分析，实现细菌的分子生物学鉴定。细菌

前言

因特征序列的测定，实现细菌的生物学鉴定。细菌16SrRNA基因全长约16SrRNA基因全长约1500bp，包含9个可变区(variableregion，V区)和10个

1500bp，包含9个可变区(variableregion，V区)和10个恒定区(constant恒定区(constantregion，C区)，在结构与功能上具有高度保守性，是细菌

region，C区)，在结构与功能上具有高度保守性，是细菌分类和鉴定中得分类和鉴定中得到广泛应用的DNA特征序列之一。对于利用16SrRNA基

到广泛应用的DNA特征序列之一。因特征核酸序列无法准确区分鉴定的一些近源菌种，也可结合其他经过验

证的基因特征序列或全基因组序列进行分子生物学鉴定。

实验环境和仪器的一般要求

开展细菌分子生物学鉴定试验的环境应具备分子生物学实验室的基本条

开展细菌鉴定试验的环境应具备分子生物学实验室的基本条件，并符合相

件，可参考聚合酶链式反应法（通则1001）相关要求并符合相应级别的生

应级别的生物安全要求。

物安全要求。

正文所用仪器有电子天平、离心机、冰箱、恒温仪、DNA定量仪器(如紫外或

所用仪器有电子天平、离心机、冰箱、恒温仪、DNA定量仪器(如紫外或

荧光分光光度仪)，聚合酶链式反应(polymerasechainreaction，PCR)分析

荧光分光光度仪)，聚合酶链式反应(polymerasechainreaction，PCR)分析

仪、电泳仪、凝胶成像仪、核酸测序仪等。

仪、电泳仪、凝胶成像仪、核酸测序仪等。

试剂及其制备方法

三羟甲基氨基称取三羟甲基氨基甲烷12.1g，加适量水搅拌溶解，并稀释至100ml，用盐称取三羟甲基氨基甲烷12.1g，加适量水搅拌溶解，并稀释至100