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脂联素基因去信号肽区原核表达及酶免检测方法研究

专业：微生物学

学生：孙强

导师：王云龙教授

主要内容

研究背景

目的及意义

实验技术路线

方法与结果

创新与结论

研究背景

脂肪细胞中发现的唯一与肥胖呈负相关性的特异性血浆蛋白。肥胖、冠心病、Ⅱ型糖尿病患者血浆中的脂联素低于正常水平。

编码人脂联素的apMI基因定位于染色体3q27上，长度为16kbp，包含3个外显子和2个内含子。

人脂联素由244个氨基酸组成，由分泌信号序列、特异序列、胶原重复序列、球状序列等4个结构域组成，其中球状区(gADPN)是脂联素生物活性的关键部位。

脂联素(adiponectin)

目的及意义

可作为冠心病、糖尿病的辅助诊断依据，并对疾病发生进行有效的预警；

可作为评价药物在治疗肥胖、冠心病和糖尿病疾病方面的效果；

进一步研究脂联素作用机制提供方便；

利用基因工程方法制备脂联素定量检测试剂盒中的标准品，提高了稳定性和生物安全性。

本研究建立的血浆脂联素酶免定量检测方法——

实验技术路线

方法与结果（一）

2、PCR扩增目的基因(678bp)

M.DNAMarkerDL2000；

1.PCRproduct;2.Negativecontrol

3、重组质粒酶切鉴定

M.DNAmarkerDL