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薄层色谱法定性和定量分析
定性分析方法
01
比移值Rf定性
对照品比较
供试品所显主斑点的颜色(或荧光)与位置(Rf)应与对照品的主斑点一致,而且主斑点的大小与颜色深浅也应大致相同,则可初步认定供试品与对照品为同一物质。
比移值Rf定性
对照品比较
采用供试品溶液与对照品溶液混合点样、展开,与对照品相应斑点应为单一、紧密斑点。
可采用多种系统展开,若供试品主斑点的Rf值及斑点颜色仍与对照品一致,则可认定该样品与对照品是同一化合物。
该法适用于已知范围的未知物定性。
比移值Rf定性
相对比移值Rs定性
与对照品的Rs值比较定性,
也可与文献收载的Rs值比较定性。
杂质检查
主要是杂质限量的检查,一般无须测定杂质的含量。
杂质对照法
适用于杂质已知,并且有杂质对照品的药物。
判断:供试品溶液如显与对照品溶液相应的杂质斑点,其颜色不得深于对照品溶液的主斑点。
供试品自身稀释对照法
判断:供试品溶液如显杂质斑点,与对照品溶液所显主斑点比较,其颜色不得更深。
该法适用于杂质结构不确定或无杂质对照品的药物。
两法并用
当药物中存在多个杂质,其中已知杂质有对照品时,采用杂质对照品法检查;共存的未知杂质或没有对照品的杂质,可采用供试品溶液自身稀释对照法检查。
要求:供试品溶液如显杂质斑点不得多于2个,与杂质对照品溶液相同位置上所显杂质斑点颜色比较,不得更深,另一杂质斑点颜色与自身稀释液主斑点比较,不得更深。
A
B
A:供试品溶液
C:自身稀释对照品溶液
C
B:杂质对照品溶液
定量分析方法
02
目视定量法
目视比较颜色深浅
通过目视比较供试品斑点与对照品斑点的颜色深浅,判断近似含量。
比较斑点面积大小
通过比较供试品斑点与对照品斑点的面积大小,进行近似含量的判断。
洗脱定量法
样品与对照品展开
将样品和对照品在同一薄层板上展开。
刮下样品斑点洗脱
从薄层板上刮下样品斑点及吸附剂,用溶剂洗脱斑点中的组分。
测定含量的适当方法
用紫外分光光度法、荧光法等适当方法测定洗脱后组分的含量。
薄层扫描法
照射光束扫描斑点
选用一定波长强度的光束照射到薄层板被分离组分的斑点上。
仪器扫描求含量
用仪器扫描后求出色斑中组分的含量。
THEEND
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