07-微生物直接计数和大小测定.pptVIP

微生物学实验;一、实验目的;二、原理;计数室

（1mmx0.1mm2)

容积10-4ml;将适当稀释过的菌悬液，加一滴在计数板上，盖上盖玻片，在显微镜下观察每小格内的细胞数，按下述方法计算出每毫升培养液中微生物的总数。

计数时，通常数五个中方格的总菌数（A），然后求得每个中方格的平均值，再乘上25（25个中方格）或16（16个中方格），就得出大方格中的总菌数，然后再换算成1ml菌液中的总菌数，乘上稀释倍数（B），即原液中的总菌数。

总菌数（个/ml）=A/5×25（或16）×10000×B。;

2、显微镜测微技术：

微生物的大小通常用测微计来测量，测微计分别有接目镜测微尺和镜台测微尺两部分。

接目镜测微尺是一块圆形玻片，在中央有一带刻度的尺，等份成50或100小格，每一格的大小是相对的，在同一接目镜下，随不同放大率的物镜而改变其大小。

镜台测微尺为一块载玻片，上胶有一圆形玻片，其中央部分有精确的刻度尺，刻度尺的长度是已知的，长度为1mm，等分为100小格，每小格间的距离即为0.01mm。;三、实验材料、器材;四、方法及步骤;?

按照下列公式即可求出在低倍镜下目镜测微尺每格的长度：

目镜测微尺每格长度（微米）=两条重合线间镜台测微尺格数×10

两条重合线间目镜测微尺格数

如：目测为30小格等于台测为20小格，已知台测每格为10微米，那么相应的在目镜测微尺上每格长度为（20×10）÷30=6.6（微米）。

用同样方法校正并求出在高倍镜上目镜测微尺每格的长度。

;（2）菌体大小的测定：

接目镜测微尺校正好后，将镜台测微尺从载物台上取下来，换上待测标本。

在高倍镜下，以目镜测微尺来测量标本的长和宽各占几格，算出该标本的大小，将测定结果填入下表。