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3.2基因工程的基本操作程序(第1课时)
一、教学目标:
1.阐明基因工程的原理和基本操作程序。
2.尝试进行PCR的基本操作并用电泳鉴定PCR的产物。
二、教学重点和难点:
1.教学重点:
(1)目的基因筛选与获取的方法,特别是PCR技术的原理和操作过程。
(2)基因表达载体的构建目的、组成及构建过程。
2.教学难点:
(1)PCR技术的原理,包括DNA半保留复制、引物的作用、温度控制的原理等。
(2)基因表达载体各组成元件的功能及构建过程中防止自身环化和反向连接的方法。
三、教学设计思路
以建构主义学习理论为指导,强调学生主动构建知识。通过创设情境、问题引导和实践活动,激发学生学习兴趣,培养学生科学思维、探究能力与社会责任,让学生在探究中理解和掌握基因工程知识,提升生物学科核心素养。
四、教学过程
【新课导入】(5分钟)
展示图片,提出问题:展示转基因抗虫棉在棉田中的生长图片,向学生提问:“同学们,我们看到的这片棉田中的棉花是转基因抗虫棉,大家知道它为什么能抵抗棉铃虫的侵害吗?培育这样的转基因抗虫棉又需要经历哪些关键步骤呢?”引导学生观察图片并思考问题。
引发思考,导入主题:给学生留出片刻思考时间,鼓励学生自由发言分享自己的想法。对学生的回答进行点评和总结,自然引出本节课的主题——基因工程的基本操作程序,激发学生的学习兴趣和探索欲望。
【新课学习】
1.基因工程的基本操作程序概述(3分钟)
利用PPT展示基因工程操作流程的示意图,讲解基因工程的基本操作程序主要包括目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定这四个步骤。
强调每个步骤在整个基因工程过程中的重要性,让学生对基因工程有一个整体的认识。
2.目的基因的筛选与获取(20分钟)
(1)目的基因的概念和实例(3分钟):讲解目的基因是在基因工程设计和操作中,用于改变受体细胞性状或获得预期表达产物等的基因。列举与生物抗逆性、优良品质、生产药物、毒物降解和工业用酶等相关基因作为实例,加深学生对目的基因的理解。
(2)目的基因的筛选(5分钟):以苏云金杆菌的Bt抗虫基因为例,讲述筛选目的基因的过程。先介绍苏云金杆菌产生Bt抗虫蛋白杀死棉铃虫的原理,引导学生思考如何找到合适的目的基因。讲解通过掌握目的基因的功能、结构、序列以及表达产物等方面来筛选目的基因,同时介绍利用测序技术、序列数据库和序列比对工具等进行筛选的方法。
(3)获取目的基因常用的方法(12分钟)
(4)利用PCR获取和扩增目的基因(8分钟):详细讲解PCR的概念,即聚合酶链式反应,是根据DNA半保留复制原理,在体外对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。利用PPT展示PCR扩增仪和DNA复制的示意图,对比体内DNA复制和PCR过程,讲解PCR的原理、所需条件(模板、原料、酶、引物等)以及各条件的作用。重点讲解引物的概念、种类(DNA单链或RNA单链,PCR中常用DNA单链)、长度(20-30个核苷酸)和结合位置(模板链的3’端)。利用动画演示PCR反应的变性、复性和延伸三个过程,让学生直观理解每个过程的温度变化、分子变化和发生的反应。讲解PCR循环次数与DNA分子数量、链数等的关系,通过课堂提问和练习,巩固学生对PCR过程的理解。
(5)其他获取方法(4分钟):简单介绍从基因文库中获取、从生物组织中直接获取和人工合成目的基因的方法。强调人工合成适用于基因比较小、核苷酸序列已知的情况,是通过DNA合成仪用化学方法直接合成。
3.基因表达载体的构建(20分钟)
(1)构建目的(3分钟):讲解基因表达载体构建的两个目的,一是使目的基因在受体细胞中稳定存在且遗传给下一代,二是使目的基因能够在受体细胞中表达和发挥作用。通过提问引导学生思考为什么要构建基因表达载体,加深学生对构建目的的理解。
(2)基因表达载体的组成(8分钟):利用PPT展示基因表达载体的结构示意图,讲解其组成元件,包括目的基因、启动子、终止子、复制原点和标记基因。分别介绍每个元件的功能,如启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位,驱动基因转录出mRNA;终止子用于终止转录;复制原点是DNA复制的起始位点;标记基因便于重组DNA分子的筛选和鉴定。对比启动子与起始密码子、终止子与终止密码子的本质、位置和功能,让学生明确它们之间的区别。引导学生思考目的基因应该插入载体的什么位置,强调目的基因应插入启动子和终止子之间的部位。
(3)构建过程(9分钟):讲解基因表达载体的构建过程,首先用同一种限制酶处理含有目的基因的DNA分子和载体(如质粒),使其产生带有黏性末端或平末端的切口,然后用DNA连接酶将目的基因片段与载体连接,形成重组DNA分子(重组质粒)。利用PPT展示限制酶切割和DNA连接酶连接的过程示意图,帮助学生理解。组织
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