HSP70对大鼠IL-6性发热影响研究开题报告.pdfVIP

二、本课题的国内外的研究现状：

热休克蛋白（HSP）最早是在处于热休克状态下的培养细胞中提取出来的，因

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而命名为热休克蛋白。研究发现HSP是一组所有的细胞能在应况下由热休

克所编码合成的序列高度保守的伴随细白，并能对抗更为严重的应激损

伤，这种现象称为热休克反应(heatshockresponse,HSR)。在这种反应过程中，

转录和翻译合成某些蛋白的被关闭，而HSP打开，产生一组热休克蛋白，

又称应激蛋白(Stressprotein,SP)。后来的研究发现高温、缺氧、再灌注局部

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损伤或等多种有害因素刺激均可产生热休克蛋白，因此广泛应用于临床。

一般情况下,除过热外,机体在炎症性发热时,体温升高大多数不超过41℃,这

种现象称为热限。既往国内外研究人员发现HSP70作为一种非特异性保护蛋白，具

有分子伴侣功能，能够增强细胞对热损伤的抵抗能力，并能修复热损伤变性的蛋

白质。在高温及各种有害因素下，HSP合成明显增加，以提高机体耐热和抗

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能力，其广泛的生理和病理作用已成为生命科学研究的热点。但是

HSP70是否也参与了体温调控过程及可能的作用机制还不清楚。因此，进一步研

究HSP70在体温调节作用及HSP70的诱导因素就具有重要的意义和应用价值。

三、本课题的研究内容和预期目标

研究内容：(1)60只大鼠随机分为热应激(HS)处理组(A组)和经热应激处理前10

min加用放线菌酮(CHX)组(B组)，Western印迹法观察热应激处理后0、

4、8、12、16h各自下丘脑内HSP70的表达水平。(2)24只大鼠随机

分为4组：①HS+IL-6组，经热应激处理后，在HSP70表达最高时，

向其下丘脑视前区(POA)注射IL-6；②CHX+HS+IL-6组，于应激前10min

腹腔注射CHX；③IL-6组，仅注射IL-6；④对照组，仅注射1μl生

理盐水。连续观察体温变化指标8h，绘制体温变化曲线。

预期目标：高水平表达的HSP70能抑制IL-6性发热。

四、本课题拟采用的研究方法、步骤

研究方法：通过热应激刺激大鼠HSP70表达，观察HSP70对IL-6性发热时的体温

的影响。

研究步骤：

准备实验器材：

1、仪器与试剂：实验用试剂均用无热原生理盐水稀释。IL-6放线菌、

酮(cyclohexi-mide,CHX)、HSP70抗体、羊抗兔IgG、盐酸

(hydrochloride)、盐酸甲苯噻嗪(acepromazinemaleate)、

立体定位仪。

2、实验动物：健康雄性SD大鼠，体质量200~250g，基础体温(37.5

±1.0)℃，由沈阳医学院实验动物。在室温(22±2)℃、湿度

(50±2)%、光照12h：12h的条件下单笼饲养，自由进食。

实验步骤：1、收集实验标本，分析。

2、热应激处理后HSP70表达水平的测定。

3、实验动物模型。

4、体温变化曲线的绘制。

5、统计学分析结果。

6、查阅参考文献。

7、得出结论并完成。

五、本课题研究的总体安排与进度

1、选题2012年7月～8月

2、资料收集、整理及撰写文献综述2012年8月～9月

3、撰写开题报告