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《生物分离工程》课程试卷及答案

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、选择题（每题2分，共20分）

1.关于分离因子β的定义，正确的是（）

A.β=两相中目标产物浓度之比

B.β=两相中杂质浓度之比

C.β=目标产物与杂质的浓度比之比

D.β=分离后产物纯度与原料纯度之比

2.超滤过程中，影响膜通量的主要因素不包括（）

A.操作压力

B.料液温度

C.膜孔径大小

D.料液pH值

3.亲和层析中，与配基结合能力最强的组分是（）

A.杂质蛋白

B.目标蛋白

C.缓冲液离子

D.膜载体材料

4.盐析法沉淀蛋白质时，盐离子浓度越高（）

A.蛋白质溶解度越大

B.蛋白质溶解度越小

C.对蛋白质等电点无影响

D.蛋白质变性程度越高

5.反渗透与超滤的根本区别在于（）

A.操作压力大小

B.膜孔径尺寸

C.分离对象分子量

D.驱动力类型

6.凝胶过滤层析中，最先被洗脱的组分是（）

A.小分子物质

B.大分子物质

C.与凝胶结合力强的物质

D.等电点接近pH的物质

7.萃取过程中，分配系数K值越大，说明（）

A.萃取剂选择性越差

B.目标产物在萃取相中浓度越低

C.萃取效率越高

D.萃取相比需越大

8.下列属于等电点沉淀特点的是（）

A.适用于所有生物大分子分离

B.沉淀条件温和，不易使蛋白变性

C.需要添加有机溶剂

D.沉淀后需立即离心分离

9.理论塔板数反映的是（）

A.层析柱的实际高度

B.色谱峰的分离度

C.填料颗粒的均匀性

D.混合物中组分的数量

10.生物分离工程下游工艺设计的首要原则是（）

A.成本最低化

B.产物活性保持

C.操作步骤最少

D.设备通用性最强

二、填空题（每空1.5分，共15分）

1.生物分离工程的核心目标是实现目标产物与________的分离。

2.膜分离技术中，截留率R的计算公式为R=________。

3.亲和层析的特异性主要取决于________与目标分子的结合能力。

4.盐析法常用的中性盐有________和________。

5.超临界流体萃取中，常用的超临界流体是________。

6.凝胶过滤层析的分离基础是分子间的________差异。

7.离子交换层析中，阳离子交换剂的功能基团是________。

8.等电点沉淀时，蛋白质的净电荷为________。

9.萃取操作中，萃取相与萃余相的体积比称为________。

10.生物分离工艺放大时，需重点保证________的稳定性。

三、名词解释（每题3分，共15分）

1.分离因子

2.膜通量

3.亲和层析

4.盐析

5.理论塔板数

四、简答题（共30分）

1.简述凝胶过滤层析的基本原理及其主要应用。（7分）

2.比较反渗透与超滤在分离原理、应用对象及操作压力上的差异。（8分）

3.影响蛋白质沉淀法分离效果的主要因素有哪些？请举例说明。（8分）

4.简述生物分离工程下游工艺设计的基本步骤。（7分）

五、计算题（共12分）

1.某萃取体系中，目标产物在有机相和水相中的分配系数K=5，相比R=2（有机相体积/水相体积）。试计算单级萃取率η。（6分）

2.某凝胶过滤层析柱的理论塔板数N=1600，测得某组分的保留时间tR=10min，死时间tM=2min。求该组分的分配系数K。（6分）

六、论述题（共8分）

结合单克隆抗体制备的下游分离工艺案例，说明在设计分离流程时需考虑的关键因素，并举例说明不同分离技术的选择依据。

试卷答案

一、选择题（每题2分，共20分）

1.C

2.D

3.B

4.B

5.B

6.B

7.C

8.B

9.B

10.B

二、填空题（每空1.5分，共15分）

1.杂质

2.1-Cp/Cf（或1-透过液浓度/原料液浓度）

3.配基

4.硫酸铵；（硫酸钠）

5.二氧化碳（CO?）