基于数字PCR的EGFR基因19DEL突变丰度参考测量程序.docxVIP

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《基于数字PCR的EGFR基因19DEL突变丰度参考测量程序》标准立项与发展报告

EnglishTitle:DevelopmentReportontheStandardizationProject:ReferenceMeasurementProcedureforEpidermalGrowthFactorReceptor(EGFR)GeneMutationAbundanceBasedonDigitalPCR—Part1:Exon19DeletionMutation(19DEL)

摘要

本报告旨在系统阐述国家标准《基于数字PCR的表皮生长因子受体（EGFR）基因突变丰度参考测量程序第1部分：外显子19缺失突变（19DEL）》的立项背景、核心内容、技术价值及行业影响。肺癌是我国发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，其中非小细胞肺癌（NSCLC）占主导。表皮生长因子受体（EGFR）基因突变是NSCLC关键的驱动基因，尤以外显子19缺失突变（19DEL）最为常见，其精准检测是指导靶向药物（EGFR-TKI）临床应用、实现个体化治疗的前提。然而，当前临床检测方法多样，结果存在差异，缺乏统一的计量溯源基准，影响了治疗决策的准确性与可比性。数字PCR技术因其绝对定量、高灵敏度、高特异性等优势，成为建立参考测量程序的理想平台。本标准的制定，基于中国计量科学研究院已获国际认可的参考方法，旨在建立我国EGFR19DEL突变丰度测量的国家基准。报告详细分析了标准立项对于提升我国肿瘤基因检测质量、推动精准医疗标准化、保障患者权益、以及促进相关产业高质量发展的深远意义，并明确了标准的适用范围、核心技术框架及对参与起草的标准化技术委员会的介绍。本标准的实施将填补国内该领域计量标准的空白，为临床检测实验室提供权威的校准与验证依据，最终服务于“健康中国”战略。

关键词：

表皮生长因子受体；EGFR；数字PCR；参考测量程序；基因突变丰度；外显子19缺失；标准化；精准医疗

Keywords:

EpidermalGrowthFactorReceptor;EGFR;DigitalPCR;ReferenceMeasurementProcedure;GeneMutationAbundance;Exon19Deletion;Standardization;PrecisionMedicine

正文

一、立项背景与目的意义

恶性肿瘤是严重威胁我国居民健康的重大公共卫生问题。根据世界卫生组织国际癌症研究机构（IARC）发布的2020年全球癌症负担数据，中国新发癌症病例与死亡人数均位居全球首位。数据显示，2020年中国新发癌症病例约457万例，而到2022年，这一数字已上升至约482万例，防控形势严峻。在此背景下，国家《健康中国行动—癌症防治行动实施方案（2023—2030年）》明确提出，需强化癌症防治技术攻关，在关键环节实现突破，以有效降低癌症疾病负担。

在肺癌领域，非小细胞肺癌（NSCLC）约占所有肺癌的85%。表皮生长因子受体（EGFR）基因突变是东亚NSCLC人群中最常见的驱动基因突变，发生率高达30%至40%。根据《中国非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体基因突变检测专家共识（2016版）》，EGFR敏感突变主要包括外显子19缺失突变（19DEL）和外显子21L858R点突变，两者合计占所有EGFR突变的近90%。其中，19DEL是最常见的突变类型之一。对患者肿瘤组织或液体活检样本进行EGFR基因突变状态（尤其是突变丰度）的精准检测，是临床决定是否应用EGFR酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKI）进行靶向治疗的先决条件和核心依据。

然而，当前临床实验室采用的检测技术（如ARMS-PCR、NGS、一代测序等）在灵敏度、特异性及定量准确性方面存在差异，导致不同实验室间的检测结果缺乏可比性。这种“度量衡”不统一的现象，可能影响治疗方案的制定、疗效评估以及耐药监测，最终关乎患者的生存获益。因此，建立一套准确、可靠、可溯源的参考测量程序，为临床常规检测方法提供校准和验证的“标尺”，已成为行业迫切的共性需求。

数字PCR（dPCR）作为第三代PCR技术，通过将样本分割至数万个微反应单元进行独立扩增，可实现核酸分子的绝对定量，无需依赖标准曲线。该技术对抑制剂耐受性强，且具备极高的灵敏度与特异性，非常适用于低丰度基因突变的精准定量。中国计量科学研究院在此领域已取得国际领先的研究成果，其建立的针对EGFR19DEL、L858R及T790M等关键突变的数字PCR参考测量方法，已被国际检验医学溯源联合委员会（JCTLM）数据库收录，为全球该项目的计量溯源提供了中国方案。

基于上述国家战略需求、临