基于数字PCR的EGFR基因T790M突变丰度参考测量程序.docxVIP

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《基于数字PCR的EGFR基因T790M突变丰度参考测量程序》标准立项与发展报告

EnglishTitle:DevelopmentReportontheStandardizationProjectofReferenceMeasurementProcedureforEpidermalGrowthFactorReceptor(EGFR)GeneMutationAbundanceBasedonDigitalPCR—Part3:Exon20PointMutationT790M

摘要

本报告围绕《基于数字PCR的表皮生长因子受体（EGFR）基因突变丰度参考测量程序第3部分：外显子20点突变T790M》国家标准的立项背景、核心内容与行业意义进行系统性阐述。肺癌是我国发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，其中非小细胞肺癌（NSCLC）占主导。EGFR基因突变是NSCLC关键的驱动基因和疗效预测生物标志物，其精准检测直接关系到靶向药物（如EGFR-TKI）的临床应用决策。外显子20点突变T790M是获得性耐药的主要机制，其准确定量对于监测耐药、指导后续治疗至关重要。然而，临床检测中不同方法、平台和实验室间的结果可比性存在挑战，亟需建立国家级的参考测量程序以实现量值溯源与结果统一。

本报告详细分析了该标准立项的紧迫性与战略意义，指出其响应了《健康中国行动—癌症防治行动实施方案（2023—2030年）》对加强癌症防治技术攻关的号召。报告明确了标准的适用范围与核心技术内容，包括基于数字PCR技术的试剂材料、仪器设备、操作流程及数据处理规范。该标准的制定，将以中国计量科学研究院建立的、已获国际认可的参考方法为基础，为我国临床基因检测实验室提供最高等级的计量学依据，显著提升EGFRT790M突变检测的准确性、可靠性和不同实验室间结果的可比性，最终服务于肺癌的精准诊疗与个体化医疗，具有重大的社会效益和经济效益。

关键词

-表皮生长因子受体；EpidermalGrowthFactorReceptor(EGFR)

-基因突变丰度；GeneMutationAbundance

-数字PCR；DigitalPCR(dPCR)

-参考测量程序；ReferenceMeasurementProcedure(RMP)

-T790M突变；T790MMutation

-标准化；Standardization

-量值溯源；MetrologicalTraceability

-非小细胞肺癌；Non-SmallCellLungCancer(NSCLC)

正文

一、立项背景与目的意义

恶性肿瘤是严重威胁我国居民健康的重大公共卫生问题。根据世界卫生组织国际癌症研究机构（IARC）发布的2020年全球癌症负担数据，中国新发癌症病例与死亡人数均位居全球首位。数据显示，2020年中国新发癌症病例约457万例，而到2022年，这一数字已上升至约482万例，防控形势严峻。在此背景下，国家《健康中国行动—癌症防治行动实施方案（2023—2030年）》明确提出，需集中优势力量在防治技术等关键环节取得突破，加强癌症的筛查、早诊早治和科研攻关。

在肺癌领域，非小细胞肺癌（NSCLC）约占所有肺癌的85%。表皮生长因子受体（EGFR）基因突变是东亚NSCLC人群中最常见的驱动基因突变，发生率高达30%至40%。根据《中国非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体基因突变检测专家共识》等权威临床指南，EGFR基因突变状态是决定患者能否从EGFR酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKI）靶向治疗中获益的先决条件。常见的敏感突变包括外显子19缺失突变（19del）和外显子21点突变（L858R），二者合计占所有EGFR突变的近90%。然而，患者在经过一线EGFR-TKI治疗后，约50%-60%会产生获得性耐药，其中外显子20点突变T790M是最主要的耐药机制，占比超过50%。因此，对T790M突变进行及时、准确的检测与定量，对于判断耐药、转换至三代EGFR-TKI治疗具有决定性的临床意义。

当前，临床实验室检测EGFR突变（包括T790M）的技术平台多样，包括ARMS-PCR、二代测序（NGS）、数字PCR（dPCR）等。尽管这些技术各有优势，但不同方法、不同试剂、不同实验室间的检测结果，特别是在对低丰度突变（如治疗后监测中的微量残留）进行定量时，可能存在差异，影响临床决策的一致性和可靠性。数字PCR作为一种新兴的核酸绝对定量技术，其不依赖于标准曲线，对抑制剂耐受性强，且具备极高的灵敏度与特异性，在基因突变检测，尤其是痕量核酸定量方面展现出独特优势，已被视为潜在的参考测量技术。

值得关注的是，中国计量科学研究院已在