硫酸化川明参多糖的制备、结构表征及其抗氧化活性分析.pdfVIP

摘要

川明参（Chuanminshenviolaceum）中含超过200种天然活性物质。这些活性物

质主要包括香豆素、萜类化合物以及多糖类化合物，具有极高的营养和经济价值。目

前，川明参研究多集中于原多糖的活性，对于化学修饰川明参多糖缺少系统性的研究。

基于此，本研究以川明参为原料，对其多糖进行提取、硫酸化修饰及分离纯化，研究

纯化硫酸化川明参多糖（PurifiedSulfatedChuanminshenviolaceumPolysaccharide

Components，S-CVPs-1-G）的化学结构，考察S-CVPs-1-G的抗氧化活性，以期为川

明参多糖的高值化利用提供理论依据及实际参考。主要研究内容及结果如下：

（1）采用超声辅助酶法水提醇沉提取川明参粗多糖（Chuanminshenviolaceum

Polysaccharides，CVPs），提取率为14.32±0.32%。通过响应面优化实验，确定了硫酸

化制备工艺的最佳条件为：浓硫酸与正丁醇比例为2.80：1，反应时间为1.50h，硫酸

铵添加量（以多糖质量为基准）为126.00%。在此条件下，三个平行实验的取代度均

值为0.58±0.06。进一步通过DEAE-52纤维素柱分离，得到两个组分S-CVPs-1和S-

CVPs-2，得率分别为17.99±0.80%和9.41±0.61%。体外抗氧化活性测定结果显示，

S-CVPs-1的DPPH·清除率和总还原力均优于S-CVPs-2。因此，将S-CVPs-1通过

SephadexG-100凝胶柱层析纯化，得到组分S-CVPs-1-G，其得率为50.30±0.14%。

（2）对S-CVPs-1-G组分进行结构表征。利用紫外扫描（UV）、凝胶渗透色谱

（HPGPC）、傅里叶红外光谱（FTIR）、电镜扫描（SEM）、气质联用（GC-MS）、核

磁波谱仪等方法对S-CVPs-1-G组分进行结构表征，单糖组成分析显示，S-CVPs-1-G

主要由甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖和半乳糖组成，摩尔占比分别为1.14%、5.93%、

89.56%和1.05%，其中葡萄糖含量最高，其次是半乳糖醛酸。HPGPC分析结果表明

S-CVPs-1-G重均分子量为4.20kDa。傅里叶红外光谱扫描结果表明，S-CVPs-1-G在

-1-1

红外光谱中显示出硫酸化特征吸收峰，分别位于1204cm和816cm处。该化合物

结构中不仅包含糖醛酸单元，而且还具有α型和β型糖苷键的构型。与单糖组成分析

结果一致。电镜扫描显示S-CVPs-1-G表面呈片状，有条纹状缝隙。甲基化分析表明，

S-CVPs-1-G由7个不同的糖残基组成，最主要的糖苷键为(1→4)-GalA(p)-(1→，占

57.87%。综合核磁共振信号，推测S-CVPs-1-G是以→4)-Glcp-(1→4)-α-Glcp-(1→3)-β-

Glcp-(1→4)-α-D-GalpA(OMe)-(1→为主链的葡聚糖。

（3）探究粗多糖CVPs和S-CVPs-1-G的体外抗氧化活性及其对HO诱导的

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HepG2细胞氧化损伤的修复作用。结果显示，S-CVPs-1-G在DPPH·、·OH和ABTS

+·清除率及还原力方面均优于CVPs。在1.0~10.0mg/mL浓度范围内，S-CVPs-1-G对

正常HepG2细胞无明显毒性，当浓度达到15.0mg/mL时，细胞存活率下降至90%以

下，表明1.0~10.0mg/mL范围是S-CVPs-1-G对HepG2细胞的安全作用浓度。400

μmol/L的HO处理HepG2细胞后，细胞存活率为57.20%，该浓度适宜用于构建氧

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化损伤模型。S-CVPs-1-G对HO诱导的HepG2细胞氧化应激有显著抑制作用，并