CN1911187A 大脑皮层局灶性缺血再灌注损伤动物模型的制作方法 （华中科技大学）.docxVIP

[19]中华人民共和国国家知识产权局

[12]发明专利申请公布说明书

[21]申请号200610019640.2

[51]Int.Cl.

A61D99/00(2006.01)

G09B23/28(2006.01)

[43]公开日2007年2月14日[11]公开号CN1911187A

[22]申请日2006.7.14

[21]申请号200610019640.2

[71]申请人华中科技大学

地址430074湖北省武汉市洪山区珞喻路1037号

[72]发明人骆清铭骆卫华王珍李鹏程

[74]专利代理机构华中科技大学专利中心代理人曹葆青

权利要求书1页说明书9页附图2页

[54]发明名称

大脑皮层局灶性缺血再灌注损伤动物模型的制作方法

[57]摘要

本发明公开了一种大脑皮层局灶性缺血及再灌注损伤动物模型的制作方法，包括①麻醉动物，暴露和确立要建立缺血再灌注的皮层区域；②在显微镜下将直径为50-1000微米的细线制成的线段或者闭合环，并放置在上述准备建立缺血再灌注的皮层区域，在此皮层区域的动脉供应支与细线相交的位置，用带线缝合针将脑膜、动脉供应支及细线一起结扎；③采用组织化学方法观察脑梗塞的位置和体积，或者利用行为学实验评价功能缺损水平。还可以在显微镜下切断细线上的手术线结，取下细线和切断后的线结，进行缺血后的再灌注。本发明所制作的模型可以提供良好的观察视野，从而有利于实时高分辨地观测缺血及其再灌注前后血流血氧等参数的动态变化过程。

200610019640.2权利要求书第1/1页

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1、一种大脑皮层局灶性缺血再灌注损伤动物模型的制作方法，其步骤包括：

(1)麻醉动物，暴露和确立要建立缺血再灌注的皮层区域；

(2)在显微镜下将直径为50-1000微米的细线制成的线段或者闭合环，线段或者闭合环的形状和大小与上述皮层区域相匹配，再将线段或者闭合环放置在上述准备建立缺血再灌注的皮层区域，在此皮层区域的动脉供应支与细线相交的位置，用带线缝合针将脑膜、动脉供应支及细线一起结扎；

(3)采用组织化学方法观察脑梗塞的位置和体积以及皮层细胞的病理变化，或者利用行为学实验评价功能缺损水平。

2、根据权利要求1所述的制作方法，其特征在于：在步骤(2)与(3)之间进行下述步骤：缺血处理完成后，在显微镜下切断细线上的手术线结，取下细线和切断后的线结，进行缺血后的再灌注；

200610019640.2说明书第1/9页

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大脑皮层局灶性缺血再灌注损伤动物模型的制作方法

技术领域

本发明属于医疗评价、检测技术领域，具体涉及一种大脑皮层局灶性缺血及再灌注损伤动物模型的制作方法。

背景技术

脑中风是目前全世界人类的第三大致死病，并有逐年增加的趋势。临床脑中风有三个特点：1、临床上约80%病例的梗塞体积较小(28-80mm3),约占同侧大脑半球体积的4.5-14%;其余20%病例为恶性的或致命的梗塞，其梗塞体积可达同侧大脑半球体积的39%以上。2、缺血后有明显的再灌注；

3、损伤后的脑功能重建。

目前至少有10种啮齿类局部中风模型被用于实验研究，其中脑缺血再灌注损伤动物模型是在脑梗塞模型的基础上改进的，该模型的脑损伤在单纯脑缺血梗死基础上增加了血流再灌注，可进一步造成缺血区域的损伤，为研究脑缺血再灌注损伤的病理机制提供了一个很好的模型，也将成为开发新的改善再灌注损伤的药物的有力工具。大多数的局灶性脑缺血模型如：MCA0模型，采用阻塞大脑中动脉的形式，在同侧的前脑形成大小不确定的病变区域，梗塞的范围近似于人类恶性的和致命的梗塞；光化学的方法虽然可建立定位准确的皮层梗塞模型，但是此模型对血管系统的损害较大，因而不适合研究缺血再灌注后的功能恢复。Wei等通过永久性地结扎供应大鼠桶状皮层的大脑中动脉的分支而建立的小中风(Ministroke)模型，其优点在于可以控制缺血病变在一个较小的范围和确定的区域，其缺点在于无法确定缺血后的再灌注，手术难度和风险较大。ShigeruWatanabe等采用铜环局部缓慢压迫皮质的方法建立的大脑局灶性皮质缺血模型，虽然也可以得到确定的缺血灶和再灌注，但是不利于实时观察缺血病变灶的范围和空间分布。而且上述两种方