CN1763228A 大容量组织阵列制作方法 （南方医科大学）.docxVIP

[19]中华人民共和国国家知识产权局

[12]发明专利申请公开说明书

[21]申请号200510100217.0

[51]Int.Cl.

C12Q1/68(2006.01)

G01N33/50(2006.01)

[43]公开日2006年4月26日[11]公开号CN1763228A

[22]申请日2005.10.12

[21]申请号200510100217.0

[74]专利代理机构广州市天河庐阳专利事务所代理人胡济元

权利要求书1页说明书5页附图3页

[71]申请人

地址

南方医科大学

510515广东省广州市广州大道北1838号

[72]发明人蒋会勇赵彤

[54]发明名称

大容量组织阵列制作方法

[57]摘要

本发明大容量组织阵列制备方法是首先制备多张组织阵列切片，其特征是把多张组织阵列切片排列在同一张载玻片上；然后在载玻片上滴加43~49℃的水将组织阵列切片展开；再排出载玻片上的水，使切片贴在载玻片上；最后在60℃下加热1-2小时用二甲苯脱蜡。本发明制作出的组织微阵列容量大，制备简单方便；同时采用了在玻片上滴温水的展片方法，使展片效果易于控制。并且微阵列中包含的标本样本大，检测时更能弥补发生在同一亚组组织同在一个微阵列中可能出现的假阴性结果的影响。

200510100217.0权利要求书第1/1页

2

1.一种大容量组织阵列制作方法，含有以下步骤：首先制备多张组织阵列切片，其特征是把组织阵列切片排列在同一张载玻片上；然后在载玻片上滴加43～49℃的水，展开组织阵列切片；再排出载玻片上的水，使切片贴在载玻片上；最后在60℃下加热1～2小时后用二甲苯脱蜡。

2.权利要求1所述的大容量组织阵列制作方法，其特征在于所述的组织阵列切片的周边向外延伸一空白石蜡切片凸起至载玻片的边缘外。

3.权利要求1或2所述的大容量组织阵列制作方法，其特征在于所述的组织阵列切片上含有组织芯的部分为矩形。

4.权利要求1所述的大容量组织阵列制作方法，其特征在于所滴加的水的温度是45℃。

5.权利要求3所述的大容量组织阵列制作方法，其特征在于所述的组织阵列切片由以下方法制备：将含组织芯的石蜡块在40℃下干烤10分钟，再-20℃冷冻30分钟后进行切片，然后切除切片组织芯1上下及左边的空白蜡膜，最后切除右边下部的空白蜡膜，保留上部的空白蜡膜形成一凸起2。

6.权利要求1所述的大容量组织阵列制作方法，其特征在于组织芯含有慢性扁桃体炎组织、淋巴结反应增生、淋巴瘤、鼻咽癌、大肠癌、肺癌组织、乳腺癌其中一种或两种以上。

200510100217.0说明书第1/5页

3

大容量组织阵列制作方法

技术领域

本发明涉及生物芯片领域，具体涉及大容量组织阵列制作方法。

背景技术

组织微阵列(tissuemicroarray,TMA)是将数十个到上百个的组织样本整齐有序地排列在同一张载玻片上而形成的微缩组织切片，所以又称组织芯片(tissuechip)技术。它是将若干石蜡包埋块上的各种典型组织转移到一个新石蜡块上重新构建微型化高通量组织阵列。用该组织微阵列块进行组织切片，可在原位对众多的肿瘤组织进行DNA、RNA及蛋白质水平进行高通量的研究。对于通过免疫细胞化学、免疫组织化学(IHC)、荧光原位杂交(FISH)等方法筛选标志而言，组织微阵列是一个理想的手段。该技术不仅有助于肿瘤表征、快速筛选癌的基因扩增等，而且还可以进一步分析经过cDNA微阵列鉴定的新基因在肿瘤中的表达特征，评价其诊断和判定预后的意义，是一种快速经济的评价生物标志的方法。

传统制作组织微阵列的方法是将待检测的组织排列于同一受体蜡块内。因为蜡块大小限制，所能排列组织芯的数目是有限的，一般在一张组织芯片上适宜做做200-400个点，文献报道(MochH,KononenT,KallioniemiOP,etal.Tissuemicroarrays:whatwilltheybringto

molecularandanatomicpathology.AdvAnatPathol,2001,8:14-20.)最多是1000个组织芯。通过增加组织芯数目提高阵列容量就存在切片难以切全或切片