食品中常规项目的微生物检验课件.pptxVIP

食品中常規專案的微生物檢驗

8.3.1食品中菌落總數的測定菌落總數的定義菌落總數：是指食品檢樣經過處理，在一定條件下培養後，所得1g或1mL或1cm2表面積檢樣中所含細菌菌落的總數。

測定原理：菌落總數是指食品檢樣經過處理，在一定條件下培養後（如培養基成分，培養溫度和時間，PH，需氧性質等），所得1ml(g)檢樣中所含菌落的總數。本方法規定的培養條件下所得結果，只包括一群在培養瓊脂上生長的嗜中溫性需氧的菌落總數。菌落總數主要作為判定食品被污染程度的標誌，也可以應用這一方法觀察細菌在食品中繁殖的動態，以便對被檢樣品進行衛生學評價時提供依據。

一、實驗目的1、學習或均技術的技術方法；2、掌握食品細菌總數的測定報告方式。二、實驗材料1、電熱恒溫培養箱、冰箱、恒溫水浴鍋、託盤天平、電爐、吸管、廣口瓶、三角瓶、玻璃珠、平皿、試管、試管架、酒精燈、均質器或乳缽、滅菌刀或剪刀、滅菌鑷子、75%酒精棉球、玻璃蠟筆、登記薄2、培養基和試劑：75%乙醇、生理鹽水、15%氫氧化鈉溶液、營養瓊脂培養基實驗二食品中細菌總數的測定

1、檢驗程式菌落總數檢驗程式：檢樣→做成幾個適當倍數的稀釋液→選擇2-3個適宜稀釋度各以1ml之量分別入滅菌平皿內→每皿內加入460C適量營養瓊脂→菌落數→報告三、實驗方法

（1）以無菌操作，將檢樣25g（或25ml）剪碎以後，放於含有225ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內（瓶內預先置適當數量的玻璃珠）或滅菌乳缽內，經充分振搖或研磨做成1：10的均勻稀釋液。固體檢樣在加入稀釋液後，最好置滅菌均質器中以8000r/min~100000r/min的速度處理1min，做成1：10的均勻稀釋液。（2）用1ml滅菌吸管吸取1：10稀釋液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml滅菌生理鹽水或其他稀釋的試管內（注意吸管尖端不要觸及管內稀釋液，下同），振搖試管混合均勻，做成1：100的稀釋液。（3）另取1ml的滅菌吸管，按上項操作順序作10倍遞增稀釋液，如此每遞增稀釋一次，即換用1支1ml滅菌吸管。2、檢樣稀釋及培養

（4）根據食品衛生標準要求或對檢樣污染情況的估計，選擇2～3個適宜稀釋度，分別在作10倍遞增稀釋的同時，即以吸取該稀釋度的吸管移1ml稀釋液於滅菌平皿內，每個稀釋度作兩個平皿。（5）稀釋液移入平皿後，應及時將涼至460C營養瓊脂培養基[可放置在（（46±1）0C）水浴鍋內保溫]注入平皿15ml～20mL，並轉動平皿使混合均勻，同時將營養瓊脂培養基傾入加有1ml稀釋液（不含樣品）的滅菌平皿內作空白對照。（6）等瓊脂凝固後，翻轉平板，置（36±1）0C恒溫箱內培養（48±2）h取出，計算平板內菌落數目乘以倍數，即得1g（1mL）樣品所含菌落總數。

3、菌落計算方法（1）菌落計數方法做平板菌落計數時，可用肉眼觀查，必要時用放大鏡檢查，以防遺漏。在記下各平板的菌落數後，求出同稀釋度的各平板平均菌落總數。（2）菌落計數的報告①平板菌落數的選擇選取菌落數在30～300之間的平板作為菌落總數測定標準。一個稀釋度使用兩個平板，應採用兩個平板平均數，其中一個平板有較大片狀菌落生長時，則不宜採用，而應以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數，若片狀菌落不到平板的一半，而其餘的一半中菌落分佈又很均勻，即可計算半個平板後乘2以代表全皿菌落數。平皿內如有鏈狀菌落生長時（菌落之間無明顯界線），若僅有一條鏈，可視為一個菌落數；如果有不同來源的幾條鏈，則應將每條鏈作為一個菌落計。

②稀釋度的選擇應選擇平均菌落數在30～300之間的稀釋度，乘以稀釋倍數報告之。若有兩上稀釋度，其生長的菌落數均在30～300之間，則視兩者之比如何來決定。若其比值小於或等於2，應報告其平均數；若大於2則報告其中較小的數字。若所有稀釋度平均菌落數均大於300，則應按稀釋度最高的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之。若所有稀釋度的平均菌落數均小於30，則應按稀釋度最低的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之。若所有稀釋度均無菌落生長，則以小於1乘以最低稀釋倍數報告之。

若所有稀釋度的平均菌落數均不在30～300之間，其中一部分大於300或小於30時，則以最接近30或300的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之。③菌落數的報告菌落數在100以內時，按其實有數報告，大於100時，採用二位有效數字，在二位有效數字後面的數值，以四捨五入方法計算。為了縮短數字後面的零數，也可用10的指數來表示。

8.3.2食品中大腸菌群的測定大腸菌群的定義:大腸菌群並非細菌學分類命名，而是衛生細菌領域的用語，它不代表某一個或某一屬細菌，而指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關的細菌，這些細菌