侧流式核酸适配体生物传感器检测甲胎蛋白肿瘤标志物的研究及应用.pdfVIP

摘要

甲胎蛋白（Alpha-fetoprotein,AFP）作为肝细胞癌（HepatocellularCarcinoma,HCC）

关键的肿瘤标志物，对其进行快速、灵敏的检测在癌症早期诊断中具有至关重要的意义。

本研究针对传统AFP检测方法操作繁琐、成本高昂等问题，创新性地将核酸适配体应

用于侧流式生物传感器，构建了三种新型检测体系，并对其性能展开系统评估。

1．基于丁醇脱水法的双抗体侧流式试纸条。本实验创新性地将金纳米粒子与抗体

的偶联方式由传统的吸附法改变为丁醇脱水法，并通过系统优化偶联与检测条件，显著

提升了检测灵敏度。该传感器肉眼检测限为5ng/mL，比商业化的AFP检测试剂盒灵敏

度（10-25ng/mL）提高了2-5倍，线性范围为0-100ng/mL（R²=0.9936），血清基质干

扰小，为后续研究提供了性能基准。

2．基于凝集素-适配体的侧流式试纸条。本实验基于凝集素能够特异性识别糖基化

AFP蛋白以及适配体具备高亲和力的特点，将二者代替传统的双抗体，实现对AFP的

检测。优化后肉眼检测限为10ng/mL，线性范围0-100ng/mL（R²=0.9918）。然而，血

清基质干扰显著，加标血清实验中灵敏度下降至20ng/mL，需通过样本稀释或预处理优

化以提升实用性，该研究为蛋白-核酸适配体复合探针设计提供了新思路。

3．基于双适配体的侧流式试纸条。本实验创新性地将AP-273适配体同时作为检测

探针与捕获探针，进而实现对AFP抗原的检测。优化后，肉眼检测限为10ng/mL，线

性范围0-100ng/mL（R²=0.9906）。在真实样本检测中能有效区分健康人与肝癌患者血

清标本，展现了适配体在即时检测中的潜力。

本研究将AFP适配体用于侧流式试纸条检测，核酸适配体合成简便、成本低，有

望用于资源匮乏地区和大规模筛查。但是目前存在如灵敏度低于抗体，基于双适配体的

侧流式试纸条存在金纳米粒子聚集现象，临床样本验证规模有限等不足。后续可通过引

入信号放大技术、优化血清预处理过程以及扩大临床样本量等，提高检测性能和研究结

果的可靠性。

关键词：侧流式生物传感器；核酸适配体；甲胎蛋白；丁醇脱水法；即时检测

万方数据

Abstract

Alpha-fetoprotein(AFP)isakeytumormarkerforhepatocellularcarcinoma(HCC).The

rapidandsensitivedetectionofAFPiscrucialfortheearlydiagnosisofcancer.Aimingatthe

problemsofcomplexoperationandhighcostoftraditionalAFPdetectionmethods,thisstudy

innovativelyintroducednucleicacidaptamersintolateralflowbiosensors,developedthree

noveldetectionplatforms,andsystematicallyevaluatedtheirperformance.

(1)Dual-antibodylateralflowteststripbasedonbutanoldehydrationmethod.Inthis

experiment,thecouplingmethodofgoldnanoparticlesandantibodieswasinnovatively

changedfromthetraditionaladsorption-conjugatemethodto