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Bio-RadQX200微滴式数字PCR实验标准操作指南

本指南适用于Bio-RadQX200微滴式数字PCR（ddPCR）系统，涵盖探针法、EvaGreen染料法完整实验流程，包含仪器准备、试剂配制、微滴生成、PCR扩增、信号读取、数据分析及仪器维护全步骤，同时标注关键操作要点与常见问题规避方案，适配核酸绝对定量、拷贝数变异、突变检测等常规实验场景。

一、实验前期准备

1.1仪器与耗材准备

核心仪器：QX200微滴生成仪、QX200微滴读取仪、PCR扩增仪、PX1板膜封膜机、高速离心机、微量移液器（单道/8道）

专用耗材：DG8微滴生成卡匣、DG8卡匣密封条、96孔PCR板（适配QX200）、可穿刺铝箔封膜、微滴生成油、探针法/EvaGreen法ddPCR专用预混液、无酶纯水、枪头（无热源、无核酸酶）

样品要求：基因组DNA、cDNA、质粒等核酸样品需无蛋白、无盐离子污染，浓度均一，避免反复冻融，样品全程冰上放置。

1.2仪器开机预热

1.依次打开QX200微滴读取仪、电脑主机电源，仪器开机后自动自检，等待正面指示灯全部变为常绿，预热30min以上，保证仪器光路、温控系统稳定。

2.打开电脑端QuantaSoft（或QXManager）配套软件，完成设备连接，确认软件无设备报错、通讯正常。

3.提前将-20℃冷冻的仪器冰盒取出，确认冰盒完全冷冻变色（深蓝色），放