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实验?? 探究影响酶活性的因素
一.实验目的:
1.探究不同温度和PH对过氧化氢酶活性的影响。
2.培养实验设计能力。
二.方法步骤:
提出问题→作出假设→设计实验→(包括选择实验材料、选择实验器具、确定实验步骤、设计实验记录表格)→实施实验→分析与结论→表达与交流。
实例1:比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率
一).实验原理:
鲜肝提取液中含有过氧化氢酶,过氧化氢酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2。经计算,质量分数为3.5%的FeCl3溶液和质量分数为20%的肝脏研磨液相比,每滴FeCl3溶液中的Fe3+数,大约是每滴肝脏研磨液中过氧化氢酶分子数的25万倍二)方法步骤:
步骤 注意问题 解释 取4支洁净试管,编号,分别加入2mL H2O2溶液 不让H2O2接触皮肤 H2O2有一定的腐蚀性 将2号试管放在900C左右的水浴中加热,观察气泡冒出情况,与1号对照 ? ? 向3号、4号试管内分别滴入2滴FeCl3溶液和2滴肝脏研磨液,观察气泡产生情况 不可用同一支滴管
?
肝脏研磨液必须是新鲜的
?
肝脏在制成研磨液 由于酶具有高效性,若滴入的FeCl3溶液中混有少量的过氧化氢酶,会影响实验准确性
?
因为过氧化氢酶是蛋白质,放置过久,可受细菌作用而分解,使肝脏组织中酶分子数减少,活性降低
?
研磨可破坏肝细胞结构,使细胞内的酶释放出来,增加酶与底物的接触面积 2-3min后,将点燃的卫生香分别放入3号和4号试管内液面的上方,观察复燃情况 放卫生香时,动作要快,不要插到气泡中 现象:3号试管产生气泡多,冒泡时间短,卫生香猛烈复燃,4号试管产生气泡少,冒泡时间长,卫生香几乎无变化
避免卫生香因潮湿而熄灭 实例2:温度对酶活性的影响
一)实验目的:
1.初步学会探索温度对酶活性的影响的方法。
2.探索淀粉酶在不同温度下催化淀粉水解的情况。
二)实验原理:
1.淀粉遇碘后,形成紫蓝色的复合物。
2.淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖(淀粉水解过程中,不同阶段的中间产物遇碘后,会呈现红褐色或红棕色。)麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。
注:市售a-淀粉酶的最适温度约600C
三)方法步骤:
?
操作 注意问题 解释 取3支试管,编上号,然后分别注入2mL可溶性淀粉溶液 ? ? 另取3支试管,编上号,然后分别注入1mL新鲜淀粉酶溶液 ? ? 将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成3组,分别放入热水(约600C)、沸水和冰块中,维持各自的温度5min 不能只用不同温度处理淀粉溶液或酶溶液 防止混合时,由于两种溶液的温度不同而使混合后温度发生变化,反应温度不是操作者所要控制的温度,影响实验结果。 分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中,摇匀后,维持各自的温度5min 保持各自温度时间不能太短 淀粉酶催化淀粉水解需要一定时间 在3支试管中各滴入1-2滴碘液,摇匀后观察这3支试管中溶液颜色变化并记录 碘液不能滴加太多 防止影响实验现象的观察 用表格的形式显示实验步骤
序号 加入试剂或处理方法 试管 A B C a b c 1 可溶性淀粉溶液 2mL 2mL 2mL / / / 新鲜淀粉酶溶液 / / / 1mL 1mL 1mL 2 保温5min 600C 1000C 00C 600C 1000C 00C 3 将a液加入到A试管,b液加入到B试管,c液加入到C试管中,摇匀 ? 4 保温5min 600C 1000C 00C ? 5 滴入碘液,摇匀 2滴 2滴 2滴 ? 6 观察现象并记录 ? ? ? ? ?
实例3:PH值对酶活性的影响
操作步骤:用表格开式显示实验步骤:(注意操作顺序不能错)
序号 加入试剂或处理方法 试管 1 2 3 1 注入新鲜的淀粉酶溶液 1mL 1mL 1mL 2 注入蒸馏水 1mL / / 3 注入氢氧化钠溶液 / 1mL / 4 注入盐酸 / / 1mL 5 注入可溶性淀粉溶液 2mL 2mL 2mL 6 600C水浴保温5min ? 7 加入斐林试剂,边加边振荡 2mL 2mL 2mL 8 水浴加热煮沸1min ? 9 观察3支试管中溶液颜色变化变记录 ? ? ? w.w.w.k.s.5.u.c.o.m
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