乌江流域青蒿素提取及含量测定的分析研究.docVIP

【标题】乌江流域青蒿素提取及含量测定的分析研究 【作者】谭 涛 【关键词】青蒿青蒿素?溶剂提取含量测定 【指导老师】秦 宗 会 【专业】化学 【正文】1引言：疟疾是一种很古老的、世界上流行非常广、发病率和死亡率都非常高的热带寄生虫传染病。据了解，除了甲骨文中有零星记载外，2000多年前的《黄帝内经?素问》中即有《疟论篇》和《刺论篇》等，专章论述疟疾的病因、症状和疗法，并从发作规律上分为“日作”、“间日作”与“三日作”。然而，直到1880年法国人Laveran在疟疾病人血清中发现疟原虫；1897年英国人Ross发现蚊虫与传播疟疾的关系后，人们才弄明白：疟疾是由疟原虫引起的传染病，其典型症状是先发冷、后发热。发病原因是疟原虫裂殖子及代谢产物进入血液后，引起对体温调节中枢反应，使体温调节发生障碍。疟疾一般有间日疟、三日疟和恶性疟三型。另外，这种病能影响儿童生长和发育，导致贫血和出生低体重儿、孕妇得妇科病和贫血[1][2]。据世界卫生组织的报告，世界上有100多个国家为疟疾流行区，全球约25亿人生活在疫区，约22亿人受疟疾的威胁，每年3亿到5亿疟疾临床病例，病死人数为150～270万，单恶性疟每年就造成多达4亿人感染和至少100万人死亡，其中5岁以下儿童就达到100万。特别是上世纪90年代后，疟疾在世界许多国家传播加剧，已成为世界第八大致命疾病，其中约80%在撒哈拉以南的非洲，是非洲的头号杀手[3]。对此，世界卫生组织大力提倡各国研究对付疟疾的方法，我国也加入了研究的行列，在经历大量失败后终于取得中药青蒿抗疟筛选的成功，20世纪70年代初期从中药青蒿中分离得到抗疟有效单体，倍半萜内酯类化合物。之后，经临床研究取得与实验室一致的结果，抗疟新药青蒿素由此诞生[4]。1981年l0月在中国北京召开的由世界卫生组织(WHO)等主办的首次“青蒿素专题”国际会议上，我国中医研究院青蒿与青蒿素研究中心主任以《青蒿素的化学研究》为题发言，引起与会代表的极大兴趣，并认为“这一新的发现更重要的意义是在于发现这种化合物独特的化学结构，它将为进一步设计合成新药指出方向”。1983年，伦敦举行了世界植物药论坛，广州中医药大学的李国桥教授在论坛上发表的关于青蒿素的研究报告，第一次引起了牛津大学等研究机构的关注。1986年，青蒿素获得一类新药证书，2001年青蒿素被WHO认定为目前最安全有效的治疗疟疾药品[5]。青蒿为我国药典收载品种，青蒿入药始载于公元前168年左右,马王堆三号汉墓出土的帛书《五十二病方》,其后《肘后备急方》、《神农本草经》、《大观本草》、《本草纲目》等均有收录[6]。青蒿为菊科植物黄花蒿（Artemisia annua L）的干燥地上部分[7]，又名为草蒿，黄花蒿，臭蒿，苦蒿等，为一年生草本，植株有香味，具有清热解暑，除蒸，截疟的作用。临床上主要用于暑邪发热，饮虚发热，夜热早凉，骨蒸劳热，疟疾寒热，湿热黄疸等症。青蒿中的主要有效成分青蒿素(Artemisinin),是继氯喹、乙氨嘧啶、伯喹和磺胺后最热门的抗疟特效药，是高效、速效、低毒抗疟药，因此药材中青蒿素的含量对于控制药材质量具有重要的意义[8]-[9]。黄花蒿原产于中国，现许多国家都有栽培，如澳大利亚，阿根廷，保加利亚，法国，匈牙利，意大利，西班牙和美国。虽然黄花蒿在世界范围内广泛种植，但青蒿索的含量随产地不同而差异极大。现有调查结果显示，除我国少数地区外，绝大多数地区生长的黄花蒿中青蒿素含量都很低(不足0.1％)，使得青蒿素的天然资源相对匮乏。对我国广大地区野生黄花蒿中青蒿素含量的测定表明，川、渝、桂地区黄花蒿中青蒿素含量较高，有些地区高达1.0％。据测定，欧洲和美国青蒿中青蒿素的含量在0.03％～0.22％之间，中国和越南青蒿中青蒿素含量平均在0.3％～0.8％之间，乌江流域含量更高（酉阳野生青蒿中青蒿素含量至今保持全国最高纪录0.9％～1.3％）[10]。青蒿素为无色针状结晶，分子式为C15H22O5，结构为（图1），熔点为156℃—157℃，易溶于氯仿、丙酮、乙酸乙酯和苯，可溶于乙醇、乙醚，微溶于冷石油醚，几乎不溶于水。因其具有特殊的过氧基团，对热不稳定，易受湿、热和还原性物质的影响而分解[11]。结合青蒿素的特点，青蒿中药用成分提取方法主要有：水蒸气蒸馏法，有机溶剂提取法，超临界流体提取等。目前，已报道的测定青蒿素及其衍生物含量的方法有：碘量法、脉冲极谱法、紫外分光光度法[12]、还原型电化学极谱配合高效液相色谱[13]、薄层扫描法、放射免疫测定法，放射性同位素标记、红外光谱测定、园二色谱法、化学荧光法和超临界流体色谱法等[14]。?2?实验药品及仪器装置：2.1主要药品：青蒿素（中国生物制品研究，98%）、乙醚（成都市科龙化工试剂厂