对羟基肉桂酸抑制酪氨酸酶活性的动力学研究.pdfVIP

维普资讯 第36卷第 3期 日用 化 学 工 业 Vo1．36No．3 2006年6月 ChinaSurfactantDetement Cosmetics June20o6 对羟基肉桂酸抑制酪氨酸酶活性的动力学研究 龚盛昭 ，邓相庆 ，李仕梅 ， (1．广东轻3-职业技术学院轻化3-程系，广东 广州 510300；2．广东化T材药职业技术学院化妆品系，广东 广州 510610) 摘要：采用酶动力学方法研究了对羟基肉桂酸对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活力的抑制效应。结果表明，对 羟基肉桂酸对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性均有抑制作用，导致单酚酶活力和二酚酶活力下降50％的对羟 基肉桂酸浓度约分别为 0．12mmol／L和 0．5Ommol／L。对羟基 肉桂酸能明显延长单酚酶的迟滞时间， 0．2mmol／~-,l羟基肉桂酸能使迟滞时间由1．1min延长至6．2min。对羟基肉桂酸对二酚酶的抑制作用为混合 型抑制，对游离酶的抑制常数和对酶一底物络合物的抑制常数分别为0．29mmol／L和0．60mmol／L。 关键词：化妆品；酪氨酸酶；对羟基肉桂酸；抑制作用；动力学 中图分类号：TQ658 文献标识码：A 文章编号：1001—1803(2006)03—0159—04 酪氨酸酶 (EC．1．14．18．1)又称多酚氧化酶，它广 的分子设计。Nerya等人IgJ从土耳其植物 Licorice的根 泛存在于动植物体和人体内，是生物体合成黑色素的 中分离出系列含有酚羟基的黄酮类化合物，并测定了 关键酶_1，2]。酪氨酸酶是一种含铜的金属酶，每一个 这些化合物对酪氨酸酶的抑制作用。厦门大学的陈清 亚基含两个金属铜离子，两个铜离子分别与蛋白质分 西教授等人l9 J测定了苯甲酸、对氰基苯酚、熊果 子中组氨酸结合，另有一个内源桥基将两个铜离子联 苷和苯甲醛族化合物等对酪氨酸酶的抑制作用。作者 系在一起，构成酪氨酸酶催化氧化反应活性中心，能 以对羟基肉桂酸作为效应物，研究其对酪氨酸酶活力 够催化单酚羟化成二酚 (单酚酶活性)，并把二酚氧化 的影响及抑制作用机理，得到有关动力学参数，以期 成醌 (二酚酶活性)_l3j，醌在非酶促条件下形成最终的 为酪氨酸酶抑制剂的分子设计和抑制剂的实际应用提 反应产物黑色素。反应过程如下_4J： 供理论依据，为新型高效酪氨酸酶抑制剂的开发提供 COOH [0] HO~ C。。H 新的途径。 m ：， N ．． ：， N 。 ∞ 1 实验 L～酪氨酸 一多巴 。。 1．1 材料和仪器 H 职 c∞H 蘑菇酪氨酸酶、3，4一二羟基苯氨酸(L—DOPA)、 多巴醌 多巴色素 对羟基肉桂酸、 一酪氨酸为 Sigma化学公司产品， 蘑菇酪氨酸酶的比活力为 3320U／mg；二 甲亚砜 一 ： 一 一黑僚 (DMSO)、磷酸氢二钠和磷酸二氢钠均为国产分析纯； 5，6--