大豆糖蜜提取物中异黄酮和皂苷的分离和纯化.doc

  大豆糖蜜提取物中异黄酮和皂苷的分离和 纯化 张倩瑶，孔祥珍，华欲飞** 5 10 15 20 25 30 35 40 （江南大学食品学院，江苏 无锡 214122） 摘要：通过调节 pH 值，以及分步提取和添加壳聚糖，将大豆糖蜜提取物进行分离纯化。其 中调节 pH 值离心后白色沉淀加入 80%甲醇溶液两次提取，可将大豆异黄酮纯度从 15.50% 提高到 21.23%，皂苷纯度从 32.81%提高到 57.23%。上清液通过添加壳聚糖沉淀杂质可将异 黄酮纯度从 7.69%提高到 23.25%，皂苷的纯度从 12.56%提高到 29.63%。 关键词：大豆异黄酮；大豆皂苷；壳聚糖；大豆糖蜜 中图分类号：TS214.2 Isolation and Purification of the Isoflavones and Saponins from The Extracts of Soy Molasses ZHANG Qianyao, KONG Xiangzhen, HUA Yufei (School of Food Scinence and Technology,Jiangnan University, JiangSu WuXi 214122) Abstract: Using the pH adjustment method,as well as the fractional extraction and adding chitosan, soy molasses extracts were isolated and purified.After centrifugation of the white precipitate by adding 80% methanol extraction, twice the purity of soy isoflavones may be increased from 15.50% to 21.23% and the saponins purity from 32.81% to57.23%. Supernatant by adding chitosan precipitate impurities isoflavones purity increased from 7.69% to 23.25% the saponins purity from 12.56% to 29.63%. Keywords: isoflavones; soybean saponin; chitosan; Soy molasses 0 引言 大豆糖蜜是以脱脂大豆粕为原料，醇法制备大豆浓缩蛋白生产过程中产生的一种副产 品，富含植物化学物质，应用价值极高。大豆中的主要植物化学成分为异黄酮、皂苷、BBI、 磷脂、无色花色素、植物甾醇、肌醇六磷酸、ω-3 脂肪酸及其他一些尚未确定的组分。 目前发现的大豆异黄酮共有 12 种，分为游离型苷元和结合型糖苷，共分为三个系列： 即大豆黄素系列，包括大豆黄甙、丙二酰基大豆黄甙、乙酰基大豆黄甙和大豆黄素；黄豆黄 素系列，包括黄豆黄甙、丙二酰基黄豆黄甙、乙酰基黄豆黄甙和黄豆黄素；染料木素系列， 包括染料木甙、丙二酰基染料木甙、乙酰基染料木甙和染料木素。 大豆皂苷，属于三萜类齐墩果酸型皂苷，是三萜类同系物的羟基和糖分子(戊糖，己糖 或糖醛酸)环状半缩醛上的羟基失水缩合而成。它可以水解生成多种糖类和配糖体[1]。大豆 皂苷按现在的观点来看可以分为 A 组大豆皂苷，B 组大豆皂苷，E 组大豆皂苷和 DDMP 组 大豆皂苷。 目前国内对从大豆糖蜜分离纯化异黄酮和皂苷的研究还不多，国外对从大豆糖蜜中分离 纯化异黄酮和皂苷的报道主要来自于专利，本文主要是以大豆糖蜜处理后沉淀为原料，采用 丙酮和水作为提取溶剂，超声辅助提取，将提取物溶于水中，通过调节 pH，离心，上清添 加壳聚糖沉降杂质，沉淀用 80%甲醇分步提取，分离纯化异黄酮和皂苷。 作者简介：张倩瑶，（1987-）女，硕士研究生，食品科学专业。 通信联系人：华欲飞，(1962-)，男，博士生导师，主要从事植物蛋白相关研究。 E-mail: yfhua@jiangnan.edu.cn -1-   1 材料和方法 1.1 材料与方法 大豆糖蜜由山东万德福实业集团有限公司提供，大豆异黄酮标准品（纯度 99.9%购于 sigma 公司），壳聚糖（(脱乙酞度 95%，100kDa 购于青岛海维康生物制品有限公司)，Waters 45 50 55 60 65 70 75 600 高效液相色谱仪(美国 Waters 公司), 台式离心机 TPL-5（上海安亭科学仪器厂），旋转 蒸发器 RE-52（上海亚荣生化仪器厂）。 1.2 分析方法 皂苷