骨条藻中一类鞘糖脂的质谱分析研究.docVIP

  骨条藻中一类鞘糖脂的质谱分析研究# 赵方，徐继林，严小军，陈娟娟，周成旭** （浙江省宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室，浙江 宁波 315211） 5 10 15 20 25 30 35 40 摘要：运用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱联用分析系统（UPLC-Q-TOF-MS）直接分析 总脂并建立海洋硅藻中肋骨条藻（Skeletonema costatum）中鞘糖脂的结构鉴定方法。质谱 采用电喷雾电离源（ESI）、V 飞行模式，在正负离子模式下对总脂进行检测。根据在 ESI-MS/MS 下产生的特征离子碎片和中性丢失确定鞘糖脂的极性头部种类以及鞘脂骨架结构。从中肋骨 条藻中共检测到 9 种特殊的双糖鞘糖脂类。对这类微藻进行鞘糖脂的结构鉴定还属首例。 关键词：鞘糖脂；骨条藻；UPLC-Q-TOF-MS 中图分类号：Q949 Structural determination of Glycosphingolipids in microalga Skeletonema costatum by UPLC-Q-TOF-MS ZHAO Fang, XU Jilin, YAN Xiaojun, CHEN Juanjuan, ZHOU Chengxu (Key Laboratory of Applied Marine Biotechnology(Ningbo University), Ministry of Eduction, ZheJiang NingBo 315211) Abstract: Precise structural identification of Glycosphingolipids in the microalga Skeletonema costatum has been established using ultra performance liquid chromatography-electrospray ionization-quadrupole-time of flight-mass spectrometry(UPLC-ESI-Q-TOF-MS) for direct analysis of total lipid extracts. Mass spectrometry was performed in reflective time-of-flight using electron spraying ionization in postive and negative mode. Glycosphingolipids molecular species identification was based on the characteristic product ions and neutral loss yielded by different glycosphingolipids under ESI-MS/MS mode. The molecular species were confirmed by the fatty acid produced by glycosphingolipids in negative mode and the LCB produced by glycosphingolipids in postive mode. As a result , 9 lipid molecular species were identified for the first time in this microalga. Keywords: glycosphingolipids; Skeletonema costatum; UPLC-Q-TOF-MS 0 引言 鞘糖脂(Glycosphingolipids)属于鞘脂(Sphingolipids)中的一大类，存在于动物、植物、真 菌、少数原核生物和病毒中，其分子母体结构是神经酰胺，脂肪酸连接在长链鞘氨醇的 C-2 氨基上，一些单糖或寡糖是糖鞘脂的亲水极性头部(图 1)。鞘糖脂类是动、植物细胞膜的重 要组份，具有非常重要的生物学功能。糖鞘脂类可以诱导细胞增殖, 它能够增强细胞繁殖, 阻止程序性细胞死亡。鞘糖脂还可以使植物质膜稳定增强, 适应干旱[1]和抵抗寒冷的环境 [2-3] 微藻中鞘糖脂结构的研究分析。 很多鞘糖脂的鉴定方法需要对样品进行衍生化等比较复杂的前处理，再经高效液相色谱 分离脂类；也有用薄层色谱检测带有放射性标记鞘脂[4-6]。已建立的方法有气相色谱分析法、 薄层色谱分析法、高效液相色谱分析法[7-12] 、紫外吸收（UV）、荧光检测、蒸发光检测（ELS）、 、14] 基金项目：国家教育部科学研究重点项目（20081