αCaMKII在L-LTP阶段对突触传递的作用.pdfVIP

论文摘要 突触传递的长时程增强（long term potentiation ，LTP ）作为一种突触可塑性 的实验模型，已被广泛用于学习和记忆的研究中。有关NMDA 受体、αCaMKII 在LTP 中的作用，目前已存在大量的研究。但现有的研究都集中在由第一串高 频刺激诱导所产生的LTP 上，而对于NMDA 受体和αCaMKII 是否参与突触传 递再度增强的诱导及维持过程，尚无系统的研究。本实验采用前脑过量表达 αCaMKII 的蛋白修饰转基因小鼠以及正常的野生型小鼠为实验对象，通过离体 电生理学技术，研究NMDA 受体和αCaMKII 在LTP 的晚时相 （late-phase LTP , L-LTP ）阶段，突触传递被再度增强过程中的作用。本课题的研究主要包括以下 两部分： 1） L-LTP 阶段突触传递的再度增强及NMDA 受体的作用 采用脑片场电位记录技术，通过抑制NMDA 受体的活性，考察L-LTP 阶段 突触传递的再增强是否需要NMDA 受体的参与。本实验结果显示： （i） 由第一串高频刺激诱导的LTP 在持续了三个小时后，可以被第二 串高频刺激诱导而再度增强； （ii） 这种突触传递的再度增强可以被NMDA 受体选择性拮抗剂APV 有效地抑制，表明NMDA 受体在此过程中起了重要作用。 2） ɑCaMKII 对L-LTP 阶段突触传递再增强的作用 采用同样的脑片场电位技术，分别对野生型 （wild type, WT ）和转基因 (transgenic, TG ）小鼠海马的CA3-CA1 区的LTP 进行测定，并观察特异性 αCaMKII 抑制剂的作用。实验结果显示： （i） 通过高频刺激 （100Hz，1s）的诱导，两组小鼠的突触传递都能产 生LTP 和再度增强现象。在第一次LTP 开始后的30 分钟内，即 LTP 的早时相（early-phase LTP ）期间，fEPSP 幅值的增强在WT 小鼠和TG 小鼠中无明显差异；而在L-LTP 阶段（第一次LTP 开 始后的3 小时左右），WT 小鼠所维持的增强幅度略微但显著性地 高于TG 小鼠； （ii） 在由第二串高频刺激所引起的fEPSP 再度增强的情况下，无论是 增强的幅度还是维持的时间，TG 小鼠都显著地少于WT 小鼠。该 实验结果显示：CaMKII 的过量表达或可对突触传递的再度增强 造成损害。 （iii） 在CaMKII 的抑制剂NMPPI （5μM ）存在的情况下，无论是由第 一串高频刺激所引起的LTP ，包括E-LTP （30 分钟内）和L-LTP （3 小时后），还是由第二串高频刺激所引起的fEPSP 的再度增 强，从CaMKII 过表达的TG 小鼠的脑片上记录到的这些信号均 显著地低于从WT 小鼠的脑片上记录到的信号。该实验结果表明： 通过外源性药物降低TG 动物CaMKII 的量并不能逆转CaMKII 过量表达对TG 动物突触传递可塑性的损害。 关键词：α 钙离子/钙调素依赖的蛋白激酶II；NMDA 受体；突触可塑性；L-LTP ABSTRACT As an experimental model of synaptic plasticity, long-term potentiation (LTP) of synaptic transmission has been widely used in the study of learning and memory by neuroscientists. The role of NMDA receptors and αCaMKII in the process of LTP has been extensively studied. However, all such studies have focused on the LTP induced by single train